Epstein-Barr-viruksen veritesti vasta-aineille ja PCR: lle: miten se otetaan, normaali

Herpeksellä meillä on tapana ymmärtää epämuodollisia kivuliaita rakkuloita kasvojen ympärillä huulet, jotka myöhemmin muodostavat ruskeat kuorit. Valitettavasti tämä on vain yksi herpesviruksen kasvoista, jonka henkilö voi tavata 8 hypostaseissa. Tavallisesti kutsutaan herpes on tyypin 1 virus tai herpes simplex-virus. Toisen tyyppinen virus aiheuttaa sukupuolielinten herpes, kolmas tyyppi - "vesirokko" ja vyöruusu, neljäs infektiivinen mononukleoosi ja useita muita aivan vaarallisia patologioita jne. Tätä luetteloa voidaan jatkaa, mutta keskitymme herpesviruksen tyyppi 4: een, jota kutsutaan muutoin Epstein-Barr-virukseksi. Yritetään selvittää, mikä on herpesviruksen tyypin 4 virus, mikä on vaarallista, milloin ja miksi he suorittavat analyysin Epstein-Barr-virukselle ja mitä laboratoriotutkimusten tulokset sanovat.

Mikä on tyypin 4 herpesvirus?

Herpesviruksen tyyppi 4, eräs herpesvirusinfektion lajista, kuvasi 53 vuotta sitten englantilainen virologisti Michael Epstein. Hankkeen työssä professoria avusti hänen jatko-opiskelija Yvonne Barr. Näille ihmisille virus kuuluu hänen nimensä. Kuitenkin jo 15 vuotta viruksen tuntemuksen jälkeen hänen tieteellinen nimi muutettiin ihmisen herpesvirukseksi 4 ja vuosi sitten virus kutsuttiin ihmisen gamma-viruksen tyypiksi 4.

Mutta mikä on Epstein-Barr-virus? Kuten mikään muu virus, herpesviruksen tyyppi 4 virion (viruskello) koostuu geneettisestä materiaalista (tässä tapauksessa kaksisäikeisestä DNA: sta) ja ympäröivästä proteiinipäällysteestä (kapsidista). Lisäksi virusta ympäröi kalvo, joka auttaa sitä helposti sovittamaan isäntäsoluihin.

Mikä tahansa virus on ei-solumuotoinen muoto, joka on tarttuva tekijä eikä se voi kehittyä eikä lisääntyä elävän organismin solujen ulkopuolella. Herpesviruksen tyypin 4 edullinen elinympäristö on ruuansulatuskanavan epiteelisolut. He eivät myöskään kiroile leukosyyttejä, mieluummin jotain lajikkeistaan, joita kutsutaan B-lymfosyytteiksi. Se on B-solut, jotka osallistuvat aktiivisesti kehon immuunijärjestelmään. Kun B-lymfosyytit ovat kontaktissa antigeenin kanssa, joka on meidän herpesviruksen tyypin 4 virus (tarkemmin sanottuna sen antigeenit), syntyy vasta-aineita (proteiineja ja immunoglobuliineja). Ne ovat niitä, jotka voidaan havaita potilaan veressä analysoimalla Epstein-Barr-virusta (VEB).

Neljäs herpesviruksen tyyppi eristää 4 antigeenia, jotka ilmestyvät tiukasti tiettyyn sekvenssiin:

• EA on aikaisin antigeeni, joka esiintyy taudin alkuvaiheessa, kun viruspartikkelit ovat synteesivaiheessa (primäärinen akuutti infektio tai uudelleensytytys, jolla on vähentynyt immuniteetti),
• VCA on kapsidiantigeeni, joka sisältyy proteiinipäällysteeseen ja kuuluu myös varhaiseen, koska kliinisesti sairaus tällä kaudella ei ehkä edes ilmene,
• MA - kalvovesiantigeeni, ilmenee, kun virioni on jo muodostettu,
• EBNA - Nuklea (polypeptidi tai ydin) antigeeni viittaa lukuisiin myöhäisiin antigeeneihin, joiden vasta-aineet voidaan havaita jopa muutamia kuukausia taudin jälkeen ja pysyvät veressä koko eliniän ajan.

Herpesvirus tyyppi 4 on erittäin hankala. Koska virus ei ole aktiivinen elävän organismin ulkopuolella, sitä voi tarttua vain tartunnan lähteestä. Ja sen ei tarvitse olla, että kaikki taudin oireet havaitaan, infektio voi olla poistettu muoto, naamioitu tavalliseen väsymykseen. Esimerkiksi kroonisen väsymyksen oireyhtymä liittyy useimmiten Epstein-Barr-virukseen.

Yksittäisiä virioneja löytyy verestä, sylusta, siemennesteestä, emättimen eritteistä, eri elinten kudoksista. Viruksen hiukkaset, yhdessä syljen ja veren kanssa, eivät pääse ympärillämme oleviin esineisiin, joissa he ovat inaktiivisessa tilassa, kunnes jotkut päästävät ihmiskehoon. Suurin osa tapauksista infektio tapahtuu ilmassa tai yhteys (suukosten kautta) kautta. Mutta virtsan sisäinen siirto äidistä sikiöön on myös mahdollista, infektio verensiirron aikana (jos luovuttajan veri sisältää virusvirion), sukupuoliyhteyden aikana.

Kun se on tullut kehoon ja istutettu solurakenteisiin, se voi kestää 5 - 50 päivää ennen kuin tauti muistuttaa itseään. Mutta se ei ehkä muista, vuotaa piilotetussa muodossa, kuten useimmissa tapauksissa.

Kyllä, tutkimusten mukaan noin 90% aikuisista ainakin kerran elämässään kärsi VEB: hen liittyvä herpetinen infektio. Useimmat ihmiset eivät edes tienneet sitä, koska heidän kehonsa pystyi selviytymään viruksen hyökkäyksestä. Mutta tämä ei aina tapahdu.

Kuinka Epstein-Barr-virus ilmenee?

Useimmiten lääkärit joutuvat kohtaamaan käytäntönsä seuraavilla tyypillä 4 tyypin herpesvirusinfektiota:

• Krooninen muoto (esiintyy sairauden akuutin vaiheen jälkeen, on joitain yleisiä oireita sairaudesta),
• Latentti tai piilevä muoto (ei oireita, mutta virus pysyy aktiivisena ja vapautuu ympäristöön),
• Hidas muoto (esiintyy harvemmin, oireet esiintyvät yksi kerrallaan pitkään, päättyy potilaan kuolemaan).

Ensimmäistä kertaa henkilö on saanut infektion Epstein-Barr-viruksella pääasiassa lapsuudessa ja murrosvaiheessa. Huippuvuosi laskee 14-18-vuotiaana.

Ensisijainen virusinfektio on 3 eri muotoa:

• oireeton (ei kliinisiä ilmenemismuotoja),
• Hengityselimet (hengitysinfektioiden oireet: kuume, nenän kautta purkautuminen, yleinen heikkous jne.)
• infektiivinen mononukleoosi, jolla on tärkein oireiden kolmijako: korkea kuume, kurkkukipu, kellertävät kuoriot mandoliin, lisääntynyt elinten, kuten maksa ja perna; leukosyyttien määrän lisääntymisellä ja imusolmukkeiden lisääntymisellä.

Saatavilla on useita vaihtoehtoja taudin akuutin vaiheen lopettamiseksi:

• täysi elpyminen,
• taudin oireet häviävät, mutta virus pysyy kehossa ja kehittyy, vaikka se ei johda havaittaviin muutoksiin soluissa (viruskantaja),
• ei ole mitään taudin oireita, virus ei jätä kehoa vaan osoittaa myös erityistä toimintaa (piilevä muoto),
• uudelleenaktivointi (uudelleenaktivointi) latentistä muodosta,
• krooninen infektion kulku (taudin toistuminen, krooninen aktiivinen muoto, yleistynyt elinten ja kehon järjestelmien leesioiden kanssa).

Viruksen pitkäaikainen pysyminen organismissa voi tulla:

• Krooninen infektiivisen mononukleoosin muoto .
• Gematofagotsitarny oireyhtymä : vakaa kuume, verenpaineen komponentit (lisääntynyt hyytymistä), suurentunut maksa ja perna, limakalvojen verenvuotoa, keltaisuus (johtuen maksan), jonka imusolmukkeet olivat suurentuneet, neurologisia oireita.
• Poistettu muoto sekundaarisen immuunipuutteen kehittymisen kanssa : pitkäaikainen hypertermia, yleinen heikkous, lisääntynyt imusolmukkeiden voimakkuus ja lihaskipu, lihas- ja nivelkipu, usein tartuntataudit.
• Autoimmuunisairauksien kehittyminen lupus erythematosuksen, nivelreuman jne. Muodossa.
• Ilmentymiä krooninen väsymysoireyhtymä heikkeneminen yleisen hyvinvoinnin ja suorituskyvyn.
• Yleinen muoto kroonisesta infektiosta CNS: llä, sydänlihaksen sydän, munuainen, maksa, keuhkosairaus.
• Syöpä (lymfaattinen leukemia ja lymfooma), jossa on limakalvon solujen määrän patologinen lisääntyminen. Herpesviruksen tyyppi 4 ei tuhoa kantajasoluja, vaan pakottaa heidät lisääntymään aktiivisesti, minkä seurauksena lymfoidikudoksesta löydetään uusia kasvaimia.

Kuten näette, Epstein-Barr-virus ei ole yhtä vaaratonta kuin miltä se näyttää ensimmäisellä silmäyksellä, eikä siksi ole sen arvoista, että sitä kohdeltaisiin kevyesti. Erityisesti koska herpesviruksen tyyppiä 4 on tyypillistä usein viruksen kantamista ja piilevää muotoa, puhumattakaan kroonisen infektion eri muodoista, kun henkilö pysyy infektion lähteenä tietämättä sitä.

Määritetään tarttuvan aineen läsnäolo elimistössä tässä tapauksessa on mahdollista vain käyttämällä erityistä analyysiä Epstein-Barr-viruksesta, biomateriaalista, johon veri tavallisesti palvelee.

Menettelyn tiedot analyysi Epstein-Barr-virukselle

Koska tyypin 4 herpesvirusinfektiota ei joskus ole helppo tunnistaa, sen epäily ei aina pudota. Mutta on olemassa tiettyjä merkkejä, joista lääkäri voi epäillä viruksen läsnäoloa kehossa:

• vakavasti heikentynyt immuunijärjestelmä (riskiryhmässä on potilaita, joilla on HIV-infektio ja aids, potilaat elinsiirron jälkeen tai kemoterapia),
• alueellisten imusolmukkeiden lisääntyminen pään leukassa ja oksaalisessa osassa ja niiden arkuus, erityisesti jos tämä havaitaan luovuttajan verensiirron tai elinsiirron jälkeen.
• akuutti hengitysvirusinfektio (ARVI), joka tapahtuu erittäin korkeiden lämpötilojen (38-40 astetta) taustalla,
• infektoivan mononukleoosin merkkien esiintyminen, joka esiintyy useimmiten Epstein-Barr-viruksen vaikutuksen alaisena.

Vaikka edellä mainitut merkit eivät olisikaan henkilö, erikoislääkärin epäilys voi aiheuttaa joitain tavanomaisten testien tuloksia (yleinen analyysi ja veren biokemia) sekä immuunitutkimuksia.

Epstein-Barr-viruksen yleinen verikoke voi osoittaa:

• lymfosyyttien määrän lisääntyminen,
• hemoglobiini, joka osoittaa erytrosyyttien määrän vähenemistä,
• kohonnut veren koaguloituminen johtuen suuresta määrästä verihiutaleita,
• virotsitovin ulkonäkö (epätyypilliset lymfosyytit, rakenteeltaan samanlaiset kuin monosyytit).

Biokemiallinen veritesti, joka antaa tietoja sisäelinten tilasta, näyttää muutoksia maksan ja pernan toiminnassa.

Immunomääritys EBV voi osoittaa muutoksia useita erityisiä lymfosyyttien, erot määrä erilaisten immunoglobuliini-luokkiin (disimmunoglobulinemiya), immunoglobuliini puutos G, joka osoittaa heikkous immuunijärjestelmää ja sen kyvyttömyys kestää hyökkäystä viruksen.

Tällaiset epäspesifisten analyysien tulokset voivat varoittaa lääkäreitä, mutta sanoa, mitä he käsittelevät, ei ole vielä mahdollista. Kaikki pysyvät oletusten ja alustavan diagnoosin vaiheessa. Useimmissa tapauksissa lääkärit epäilevät infektiivisen mononukleoosin piilevää muotoa, vaikka muut viruspatologiat (influenssa, hepatiitti jne.) Voivat myös ilmetä samalla tavalla.

Hepatiitin tyypin 4 suuren esiintyvyyden ja mahdollisuuden siirtyä äidiltä lapseen Epstein-Barr-viruksen analyysi osoittautuu hyödylliseksi raskauden suunnittelussa. Jos äiti oli jo saanut infektion, hänen ruumiinsa kehittyi vasta-aineita hänelle. Toistuva infektio suljetaan yleensä pois pysyvän immuniteetin muodostumisen vuoksi, ja jos se on, se ei ole seurauksia, jotka ovat mahdollisia ensimmäisessä viruksen kohtaamisessa. Immuniteetti estää viruksen aktiivisuuden koko elämässä, vaikka virus itsessään pysyy kehossa, kuten mikä tahansa herpesvirus.

Jos tuleva äiti nosti herpesviruksen raskauden aikana, se on täynnä keskenmenoja ja ennenaikaista syntymää, tai virus vaikuttaa negatiivisesti vauvan kohdunsisäiseen kehitykseen.

VEB: n analyysi voi nimetä onkologi epäilemällä Burketin lymfoomaa tai diagnosoimalla kasvaimen prosesseja HIV-potilailla. Terapeutti voi turvautua tällaiseen analyysiin herpesinfektioiden diagnoosissa (erilaistunut diagnoosi viruksen tyypin selvittämiseksi). Joskus analyysi suoritetaan myös hoidon tehokkuuden arvioimiseksi.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

Valmistautuminen

Riippuen biomateriaalin tutkimuksen se voi olla verta, sylkeä, virtsaa, sylki, lapsivesi näyte, kaavinta, joka on otettu kohdunkaulasta tai virtsaputken, aivo-selkäydinnesteestä (CSF). Useimmiten lääkärit ovat turvautuneet tutkimuksessa veren, jota pidetään kaikkein informatiivinen.

On selvää, että jotkut kohdat voivat vaikuttaa haitallisesti biomateriaalin laatuun ja määrään, joten eräitä sääntöjä on noudatettava seuraavana päivänä:

• Kaikki testit (erityisesti verikokeet) tulee ottaa aamulla tyhjään vatsaan. Viimeinen ateria on oltava 12 tuntia ennen veren ottamista, joten on parempi juoda vettä syömään.
• Laskimoverta pidetään sopivimpana Epstein Barr -viruksen analyysimateriaalina ja 15 minuutin lepoa suositellaan aina ennen veren laskemista laskimosta, jos henkilö on juuri tullut laboratoriolle,
• Veren ottaminen ilman seurauksia ja analyysin tulos oli luotettava, ei ole suositeltavaa harjoittaa aktiivista fyysistä työtä ja harrastaa urheilua, juoda alkoholia ja tupakoida 12 tuntia ennen toimenpiteen aloittamista.
• Testien tulokset voivat vaikuttaa lääkkeiden saantiin. Huumeista tulee luovuttaa vähintään 2 päivää ennen analyysia. Jos tätä ei voida tehdä, on ilmoitettava laboratorionhoitajalle valmistelusta.
•  Raskaus ennen VEB: n tutkimusta tehdään toksoplasmoosin analysoimiseksi väärän positiivisen reaktion poissulkemiseksi.
• Jos Epstein-Barr-viruksen veritesti tehdään alle 5-vuotiaalle lapselle, puoli tuntia ennen manipulaatiota, vauvalle annetaan runsaasti keitettyä vettä suhteellisen pienissä osissa.

Jos toinen biomateriaali otetaan analyysiin, lääkärin tulee määrittää etukäteen kaikki analyysimenetelmän vivahteet käytetystä materiaalista riippuen.

[10], [11], [12],

Tekniikka analyysi Epstein-Barr-virukselle

Merkittävää roolia tyypin 4 herpesin ja infektoivan mononukleoosin diagnosoinnissa annetaan lääkäreille spesifisin määrityksin, jotka auttavat tunnistamaan viruksen DNA: ta tai ainutkertaisia vasta-aineita potilaan biomateriaaliin. Epstein-Barr-viruksen havaitsemiseen käytettävät laboratoriotutkimukset ovat pääasiassa entsyymi-immunoanalyysi (ELISA) ja PRC-diagnostiikka. Tarkastellaan tarkemmin molempien menetelmien ydintä ja niiden käyttäytymisen erityispiirteitä.

Immunoentsyymianalyysi VEB: llä

ELISA on Epstein-Barr-viruksen vasta-aineiden potilaiden laskimoveren tutkimus (analyysi). Seurauksena diagnoosi veressä potilaista, joilla on EBV havaitaan lajien immunoglobuliinien IgG- tai IgM (kaikki 5vidov ne) yhteen kolmesta antigeenistä (aikaisin, tai ydin- kapsidi).

Analyysi suoritetaan immunologisessa laboratoriossa, jossa potilas kestää noin 10 ml verta laskimosta. Seuraavaksi biomateriaalia jätetään huoneenlämpötilaan neljäsosa tunti, jonka aikana verenkiertoa. Hyytymä on siististi erotettu nestemäisestä osasta. Neste sentrifugoidaan ja saadaan puhdas seerumi (seerumi) verestä. Hänet on kohdistettu jatkotutkimukseen.

Menetelmän ajatus syntyi sellaisten tietojen perusteella, että kehon spesifisiä vasta-aineita tuotetaan kuhunkin virus- ja bakteerityyppiin, jotka tunkeutuvat kehoon ulkopuolelta. Elimistö tunnistaa vieraat ja tuhoaa ne ainutlaatuisilla vasta-aineilla, jotka tarttuvat tiukasti antigeeniin.

ELISA-analyysin ydin perustuu juuri tähän reaktioon. Vasta-aineita, joihin on liitetty tarroja, yhdistetään antigeeneihin. Tunnistetta käytetään aineeseen, joka reagoi erityisen entsyymin kanssa näytteen värin muuttamiseksi. Mitä enemmän tällaisia "ketjuja", sitä voimakkaampi biomateriaalin väri.

Immunoentsyymianalyysi voidaan suorittaa kolmella tavalla:

• Suora IFA. Testiliuos asetetaan kaivoihin ja jätetään noin puoli tuntia niin, että antigeenit voivat kiinnittyä kaivon seiniin. Sorboituihin antigeeneihin lisätään nestemäinen leimattu vasta-aine. Tarvittavan ajan (puolen tunnin - 5 tunnin) jälkeen, kun vasta-aineet havaitaan ja saatetaan kosketuksiin antigeenien kanssa, neste valutetaan, kuopat pestään varovasti ja entsyymi lisätään siihen. Värintamenetelmällä määritetään viruksen konsentraatio veren yksikössä.
• Epäsuora ympäristövaikutusten arviointi. Tässä menetelmässä veren seerumia ja leimattuja vasta-aineita lisätään kuoppiin sorboituneisiin antigeeneihin. Tämän tuloksena saadaan kahta ligamenttityyppiä, joista osa on leimattu. Tulos riippuu antigeenien pitoisuudesta testinäyteessä. Mitä enemmän merkitsemättömiä vasta-aineita, sitä vähemmän entsyymillä leimattuja yhdisteitä.

Lisäksi pestyyn koostumukseen lisätään erityinen reagenssi, jonka mukaan määritetään antigeeni-vasta-ainekompleksien entsymaattinen aktiivisuus.

• "Sandwich". Se poikkeaa epäsuorasta menetelmästä sillä, että alun perin antigeenit, eivät vasta-aineet, sorboituvat pinnalle. Niille lisätään liuos, joka sisältää tutkittavat antigeenit. Pesun pesun jälkeen lisätään vasta-aineita entsymaattisilla etiketeillä. Vasta-aineiden ylijäämä poistetaan jälleen ja värillinen aine saadaan käyttämällä vetyperoksidia, jota tutkitaan spektrometrisen menetelmän avulla.

Tämän tyyppinen analyysi mahdollistaa paitsi tunnistaa spesifiset vasta-aineet ja määrittää antigeenien pitoisuuden, mutta myös selventää taudin vaiheen. Asia on, että Enstein-Barr-viruksen viruksen eri antigeenit esiintyvät eri herpesinfektion vaiheissa ja siksi vasta-aineita tuotetaan tietyssä taudin jaksossa.

Täten IgG-vasta-aineet varhaiselle antigeenille (IgG EA) ilmestyvät veressä 1-2 viikkoa infektion jälkeen, kun tauti on akuutissa vaiheessa tai viruksen uudelleenaktivoinnin vaiheessa. Tämän tyyppiset immunoglobuliinit häviävät 3-6 kuukauden kuluttua. Virustartunnan kroonisessa kurssissa tällaiset vasta-aineet ovat erityisen lukuisia, ja epätyypillisessä muodossa ne puuttuvat kokonaan.

IgG-vasta-aineita kapsidiantigeeniin (IgG VCA) esiintyy myös varhaisessa vaiheessa taudin ensimmäisten neljän viikon aikana, mutta useimmat määräytyvät infektion toisen kuukauden aikana. Akuutissa vaiheessa niitä esiintyy useimmilla potilailla, mutta ne eivät ehkä näy lapsilla. Taudin kroonisessa vaiheessa, erityisesti viruksen uudelleenaktivoinnin aikana, IgG VCA: n määrä on erityisen korkea. Nämä vasta-aineet veressä olevalle henkilölle pysyvät ikuisesti, kuten itse virus, mikä osoittaa muodostuneen immuniteetin infektoivaan aineeseen.

IgM-vasta-aineet kapsidiantigeeniin (IgM VCA) saattavat näkyä jo ennen kuin taudin ensimmäiset oireet ilmestyvät. Niiden pitoisuus (titterit) on erityisen suuri taudin ensimmäisten 6 viikon aikana. Tämän tyyppinen vasta-aine on ominaista akuutin infektion ja kroonisen reaktivoinnin suhteen. IgM VCA katosi 1-6 kuukauden kuluttua.

IgG-vasta-aineet ydingeeniin (IgG EBNA) voivat osoittaa, että henkilö on aiemmin kohdannut suoraan herpesiä. Taudin akuutissa vaiheessa ne ovat äärimmäisen harvinaisia, yleensä esiintyy toipumisjaksolla (3-10 kuukautta). Veressä ne löytyvät useita vuosia infektion jälkeen.

Yksittäisten antigeenien tunnistaminen ei anna täydellistä kuvaa taudista, minkä vuoksi eri vasta-aineita koskevat testit olisi tehtävä yhdessä. Esimerkiksi, jos vain IgM VCA: ta on läsnä ja IgG EBNA: ta ei havaita, se on ensisijainen infektio.

Valitettavasti entsyymin immuunimäärityksen primaarisen herpetisen infektion tai synnynnäisen patologian tunnistaminen ei useinkaan riitä. Jälkimmäisessä tapauksessa vasta-aineita ei voida havaita lainkaan. Primääritaudin vahvistuskokeena käytetään Epstein-Barr-viruksen molekyylitutkimusta verestä tai muusta biologisesta materiaalista.

PRC-analyysi Epstein-Barr-virukselle

Tämä analyysi suoritetaan akuutin primäärinfektion vaiheessa, muuten sen tulos on virheellinen.

PRC-menetelmän ydin (polyidimensionaalinen ketjureaktio) supistuu siihen tosiasiaan, että kullakin infektoivalla aineella on oma joukko geenejä, jotka on kapseloinut DNA-molekyyliin. Taudinaiheuttajan DNA sisältyy biomateriaalin tutkimukseen otettuihin pieniin määriin (viruksilla on mikroskooppisia ulottuvuuksia), joten on erittäin vaikeaa arvioida tilannetta. Mutta jos teet erityistä reaktiota, geneettisen aineen määrä kasvaa merkittävästi, mikä antaa mahdollisuuden nimetä syy-agentti nimen mukaan.

Käytettävissä olevien instrumenttien avulla otetaan materiaali molekyylitutkimukselle, joka sijoitetaan erityiseen analysointilaitteeseen. Laite on termostaatti, jossa on erityisohjelma - lämpösyklinen tai vahvistin. Laitteessa PRC: n koko kierrosta (noin 2-3 minuuttia) vieritetään useita kymmeniä kertoja, ja siinä on kolme vaihetta:

• Denaturointi (95 asteen lämpötilassa, DNA-säikeet irrotetaan).
• Hehkutus (75 asteen lämpötilassa, VEB: lle erityisesti valmistetut "siemenet" lisätään testausmateriaaliin, jotka kiinnittyvät viruksen DNA: han).
• Geneettisen materiaalin venyminen tai lisääntyminen (erityinen entsyymi kiinnitetään siemeniin 72 asteen lämpötilassa, mikä luo uuden DNA-ketjun, mikä lisää geneettisen materiaalin määrää puoleen).

Jos polydimensioireaktion täydellinen sykli loppuu 50 kertaa, materiaalin määrä kasvaa 100 kertaa. Joten, on paljon helpompi tunnistaa taudinaiheuttaja.

Epstein-Barr-viruksen analyysi lapsessa

Kuten jo tiedämme, Epstein-Barr-virus voi aiheuttaa monia sairauksia. Kun hän on ihmiskehossa, hän pysyy pysyvästi asuvana, ja vain hyvin yhteensovitettu immuunijärjestelmän työ ei anna hänen aktiivisesti parasiittaa solujen sisällä.

Lähes 95% planeetan aikuisväestöstä asuu VEB: n sisällä, ja useimmat heistä ovat tavanneet viruksen varhaislapsuudesta lähtien. Joidenkin hän peri äidiltään, ja toiset sai viruksen vanhempiensa ja sukulaisten kiirehtivät lapselle suukkoja tai pisaroita lastentarhassa tai koulussa (tartuntataudit on yleensä ostetaan "universaali" asteikko).

Pienet lapset yleensä yleensä vetää suuhun, ja enemmän virion löytyy sylkeä. Ja jos puutarhassa useat lapset nuolevat yhtä ja samaa lelua, kun kasvattajat ovat kiireisiä omilla asioillaan, ei ole yllättävää, että virus niin aktiivisesti leviää suurissa lasten ryhmissä.

VEB: tä voidaan helposti kutsua lasten ja nuorten taudiksi, koska murrosiässä jo puolet lapsista on virusta kehossa (ja 30 vuotta ja noin 90% aikuisista). Lapset ovat sairaita eri ikäkausilla omalla tavallaan. Vuoteen asti, kunnes lapsi aktiivisesti kommunikoi ihmisten kanssa, todennäköisyys sairastua hänestä ei ole korkea. Kid vuotta vanhempi, vaikka hän ei mene päiväkoti, entistä seurallinen, leikkii ikäisensä kadulla, äitini tekee aktiivista ostosmatkat jne ja mahdollisuus kaapata virus tulee paljon suurempi.

Mutta tämä ei ole tekosyy lukita lapsi 4 seinälle. Yli 1-3 vuoden iässä tauti esiintyy suurimmassa osassa tapauksista ilman mitään oireita, paitsi lämpötilan lievän nousun ja lievän nuhineen muistuttaen kylmää. On selvää, että aiemmin lapsi tutustuu virukseen, sitä helpompi on tutustua siihen.

Se ei ole hyvä, jos lapsi sairastanut ilman ulkonäköä veren IgG VCA-vasta-aineita, jotka voivat osoittaa, että immuniteetti virusta ei muodostu, ja mahdollinen aktivoituminen viruksen heti immuunijärjestelmää luopuu löysällä. Syynä on todennäköisimmin pienten lasten immuunijärjestelmän epätäydellisyys, joka on formatiivisessa vaiheessa useita vuosia.

Koulun elämä antaa entistä enemmän edellytyksiä taudille, erityisesti nuoren ajan, kun nuoret harjoittavat aktiivisesti suudelmia. Mutta yli 3-vuotiailla lapsilla taudilla on vähemmän todennäköisesti oireetonta hoitoa. Useimmissa tapauksissa lääkärit kohtaavat tarttuvaa mononukleoosia, johon liittyy tyypillisiä oireita.

Huolimatta siitä, että patologialla voi olla pitkä kesto (noin 2 kuukautta), se ei ole niin vaarallinen eikä edellytä vakavien lääkkeiden käyttöä. Lääkärit määräävät anti-inflammatorisia ja viruslääkkeitä, jos bakteeri-infektio liittyy, he etsivät apua antibiooteilta. Muuten penisilliinejä ei tässä tapauksessa suositella, koska ne voivat aiheuttaa ihottumaa.

Älä ajattele, että jos lapsi tai nuori sairastuu tarttuvaan mononukleoosiin, niin Epstein-Barr-virus on asettunut elimistöön. Taudilla on muita vähemmän tavallisia patogeenejä, esimerkiksi sytomegalovirus (herpesvirus tyyppi 5). Ymmärtääkseen, mitä lääkärit käsittelevät, he määrittävät analyysin Epstein-Barr-virukselle ja tarvittaessa muille laboratoriotesteille.

On myös totta, että tarttuva mononukleoosi ei ole ainoa VEB: n ilmentyminen lapsuuteen. Tällä taudinaiheuttajalla on muita tauteja, mutta alueellamme ne ovat harvinaisia.

Burkittin lymfooma (erityisesti hänen VEB: nsa johtuu hänen havaitsemisestaan) löytyy pääasiassa lapsista Afrikan maissa, hyvin harvoin Amerikassa, jopa harvemmin Euroopassa (ja vain AIDSia vastaan). Leuan kasvain, jossa on imusolmukkeiden, munuaisten ja muiden elinten vaurioita, esiintyy 3-8-vuotiailla lapsilla.

Nenänielun syöpä, huomattava osa muista lymfoomat, suun karvainen leukoplakia - kaikki ilmentymät EBV taustalla voimakkaasta laskusta immuniteetin, joka tapahtuu HIV-infektion ja sen myöhemmissä vaiheissa AIDS.

Synnynnäinen immuunipuutos ja Epstein-Barr-viruksen kiinnittyminen on vaarallinen seos, joka voi johtaa proliferatiivisen oireyhtymän kehittymiseen lapsella. Tässä tapauksessa B-lymfosyyttien määrän lisääntyminen johtaa granulaatin esiintymiseen monissa elimissä, mikä estää niiden toimimasta normaalisti. Se on sairaus, jolla on korkea kuolleisuus, mutta normaalin immuniteetin taustalla se ei kehity.

Voimme sanoa, että lapsuudessa Epstein-Barr-virus on vaarallinen pääasiassa immuunipuutoksessa johtuen erilaisten komplikaatioiden kehittymisestä. Useimmissa tapauksissa kaikki on rajoitettu tarttuvaan mononukleoosiin. Ja vaikkakin hän ei vaadi erityistä hoitoa, lääkärit haluavat selvittää taudin aiheuttavan aineen luonteen, josta lapselle annetaan yleinen verikoke, entsyymi-immunoanalyysi ja PRC.

Koska lapsuudessa on pääasiassa ensisijainen infektio, on aivan mahdollista rajoittaa vain OAK: ta ja Kiinaa, joka on varsin informatiivinen vasta diagnosoidussa sairaudessa.

[13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22],

Normaali suorituskyky

PRC-analyysin tulosten käsittely suoritetaan elektroforeesilla tai käyttämällä merkittyjä "alukkeita". Jälkimmäisessä tapauksessa riittää lisäämään reagenssi (kromogeeni) ja määrittämään värin avulla, onko näytteissä virioneja. Elektroforeesin positiivisen tuloksen sanotaan olevan silloin, kun näytteessä on DNA-säikeitä, jotka ovat pituudeltaan erilaisia.

Taudin ja oireeton viruskantajan inkubointijaksolla PRC antaa negatiivisen tuloksen, kuten viruksen absoluuttisen puuttumisen tapauksessa kehossa. Ensisijaisen infektion kehityksen alkaessa Kiinan kansantasavalta reaaliajassa voi antaa sekä positiivisia että negatiivisia tuloksia, jotka eivät millään tavoin selkeitä tilannetta.

Mutta sairauden korkeudella (akuutti vaihe), sen kroonisella kurssilla tai viruksen uudelleen aktivoimisella (paheneminen) ja epätyypillisten muotojen tapauksessa analyysi on positiivinen. Jos henkilö on ollut pitkään sairas, ja virus kehossaan on passiivisessa tilassa, PRC-analyysi antaa negatiivisen tuloksen, ts. Tämän analyysin suorittaminen tänä aikana ei myöskään ole suositeltavaa, kuten liian aikaisessa taudin aikana.

On sanottava, että tämän tyyppisten laboratoriotestien tarkat tulokset ovat mahdollisia vain primaarisen infektion ja muiden virusten virion puuttumisen vuoksi.

Nyt, kun kyseessä on Epstein-Barr-viruksen entsyymi-immunoanalyysi. Hänellä on samat vaatimukset. 5 tai 6 tyypin herpesviruksen, toksoplasmoosin ja HIV-infektion läsnäolo voi vääristää tulosta huolimatta analyysin laiminlyönnistä käsittelystä tai käytettyjen reagenssien heikkoudesta. Tällöin voidaan tarvita lisätutkimuksia, ottaen huomioon mahdolliset taudin aiheuttajat.

Normaalit testitulokset, jotka osoittavat viruksen puuttumisen kehossa, pidetään negatiivisina kaikissa 4 testissä: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA ja IgG EBNA. Kyllä, jokainen testi suoritetaan erikseen, koska antigeenit esiintyvät taudin eri aikoina. Joskus vain yksittäisiä testejä voidaan antaa, mutta useimmissa tapauksissa on tehtävä kaikki neljä analyysiä, mutta taudin eri aikoina.

Esimerkiksi taudin inkubointijaksolla, kuten infektion puuttuessa, mikään neljästä vasta-ainetyypistä ei löydy verestä. Tällaista tulosta ei voida pitää riittävänä, koska se ei salli äskettäin sairastuneen henkilön erottua terveenä.

Ensisijaisen sairauden kehityksen alussa vain vasta-aineet IgM VCA esiintyvät veressä. Taudin alkuvaiheessa IgG VCA liitetään niihin.

Primaarisen infektion akuutti vaihe esiintyy muodostettaessa kolmenlaisia vasta-aineita: IgG VCA, IgM VCA ja IgG EA, jolla on kaikkein havaittavin vasta-aine IgG kapsidiantigeeniin. Sama vasta-aineiden koostumus jatkuu ja puoli vuotta taudin akuutin vaiheen jälkeen, mutta IgM VCA: n määrä vähitellen vähenee nollaan.

Kuuden kuukauden kuluttua taudista IgG EBNA-vasta-aineet ilmestyvät veressä, samanaikaisesti IgG EA -immunoglobuliinit vähenevät ja IgM VCA puuttuu kokonaan.

Taudin kroonisessa vaiheessa tai viruksen uudelleenaktivoinnissa voi olla erilaisia indikaattoreita. Useimmiten kaikki neljä vasta-ainetyyppiä löytyy verestä. Mutta voi olla, että immunoglobuliineja IgM VCA ja IgG EBNA ei löydy.

Virologisen infektion komplikaatio tuumoriprosesseilla tapahtuu IgM VCA-vasta-aineiden puuttuessa ja IgG EBNA-immunoglobuliineja ei havaita kaikissa tapauksissa.

Entsyymi-immunoanalyysi määrittää paitsi tiettyjen vasta-aineiden läsnäolon myös niiden pitoisuuden, minkä ansiosta on mahdollista arvioida tarkemmin patologian vaihe ja mahdolliset seuraukset. Ei ole tarpeen puhua tiettyjä lukuja. Loppujen lopuksi jokainen laboratorio analysoi yhden mahdollisista tavoista käyttäen erilaisia reagensseja, joten digitaalisessa suunnittelussa eri laboratorioiden analyysin tulokset voivat poiketa toisistaan.

Potilas on velvollinen antamaan lomakkeen, jossa arvojen kynnysarvo (referenssiarvo) ilmoitetaan. Jos tulos on kynnysarvon alapuolella, sitä pidetään normaalina (negatiivisena) indikaattorina. Jos määritetty luku on suurempi kuin viitearvo, kaikki osoittaa positiivisen tuloksen, mikä tarkoittaa, että virus elää kehossa. Määritetyn arvon arvo osoittaa VEB-virion taudin vaiheen ja organismin populaation, ts. Noin patologian vakavuudesta.

Jos ELISA antaa negatiivisen tuloksen, se osoittaa vain, että aiemmin henkilöllä ei ollut yhteyttä VEB: hen. Mutta onko olemassa virusta läsnä ruumiissa tällä hetkellä sanoen varmasti mahdotonta. Negatiivinen tulos voi aiheuttaa patogeenin inkuboimista kehossa ja oireeton viruksen kantamista. Joskus, jotta varmistetaan, että virus ei ole tartunnan kehossa, on tarpeen suorittaa toinen testisarja jonkin ajan kuluttua.

Jos Epstein-Barr-viruksen entsyymin immunoanalyysin tulos on vain hieman korkeampi kuin viitearvot, tulosta pidetään kyseenalaisena. Syy aiheuttaa useimmiten sairauden varhaisvaihe tai toisen viruksen virion esiintyminen elimistössä. Tässä tapauksessa kahden viikon jälkeen on suositeltavaa suorittaa toinen testi VEB: lle ja mahdollisesti muille taudinaiheuttajille.

[23], [24], [25], [26], [27], [28], [29], [30],

Mitä tulee Epstein-Barr-viruksen analyysiin ja kun on mahdollista odottaa tuloksia, ei odoteta olevan erityisiä vaikeuksia. Vakavassa hyvin varustetussa laboratoriossa vastauksen on odotettava enintään 2 päivää biomateriaalin toimittamisen jälkeen. Kiireellisessä analyysissä tarvittavissa tilanteissa vastaus voidaan saada parin tunnin kuluttua.

Epstein-Barr-viruksen analyysin suorittaminen on välttämätöntä testatussa laboratoriossa, jossa on sekä laadun reagensseja että päteviä asiantuntijoita. Silti tutkimus maksaa rahaa (eikä pieni, yhden tyyppisten vasta-aineiden analyysi maksaa noin 150-170 UAH.) Ja en haluaisi saada vääriä tuloksia, mutta myöhemmin on mahdollista palata toiseen laboratorioon, uudelleenanalyysiä varten. 

[31], [32], [33], [34], [35]