^

Terveys

A
A
A

PCR-menetelmä geneettisten sairauksien diagnosoimiseksi

 
, Lääketieteen toimittaja
Viimeksi tarkistettu: 23.04.2024
 
Fact-checked
х

Kaikki iLive-sisältö tarkistetaan lääketieteellisesti tai se tarkistetaan tosiasiallisen tarkkuuden varmistamiseksi.

Meillä on tiukat hankintaohjeet ja vain linkki hyvämaineisiin mediasivustoihin, akateemisiin tutkimuslaitoksiin ja mahdollisuuksien mukaan lääketieteellisesti vertaisarvioituihin tutkimuksiin. Huomaa, että suluissa ([1], [2] jne.) Olevat numerot ovat napsautettavia linkkejä näihin tutkimuksiin.

Jos sinusta tuntuu, että jokin sisältö on virheellinen, vanhentunut tai muuten kyseenalainen, valitse se ja paina Ctrl + Enter.

PCR on uusi saavutus molekyyligenetiikassa, jota käytetään DNA-monistukseen ja sallii DNA: n spesifisen osan (eli mikä tahansa mielenkiinnon kohteena oleva geeni) replikoituu nopeasti in vitro yli 200 000 kertaa. Reaktion suorittamiseksi riittää yhden solun DNA-materiaalin saanti; PCR: llä monistetun DNA: n määrä on niin suuri, että tämä DNA voidaan yksinkertaisesti värjätä (käyttämällä radioaktiivisia koettimia elektroforeesin jälkeen ei tarvita). Edellytyksenä PCR: n johtamiselle on monistetun DNA-alueen nukleotidisekvenssin tuntemus keinotekoisesti syntetisoitujen alukkeiden oikeaan valintaan.

Tällä hetkellä, PCR on prosessi, joka tapahtuu yhdessä putkessa ja joka koostuu toistuvista monistussykliä (kopiointi, kopio) spesifisten DNA-sekvenssien saamiseksi riittävän suuren määrän kopioita, jotka voidaan tunnistaa elektroforeesilla. Yksi keskeinen osa reaktion - "alukkeet" - synteettisiä oligonukleotideja, joka koostuu 20-30 emästä täydentävä "Sites" (alueet) hehkutus (yhteys) on tunnistettavissa osan templaatti-DNA.

PCR etenee automaattisesti ohjelmoitavassa termostaatissa - termosyklissä (thermocycler). Kolmivaiheinen aikana, joka jäljennöksiä saadaan tunnistettavissa osan templaatti-DNA, toistettiin 30-50 kertaa mukaisesti ennalta määrätyn ohjelman lämpösyklilaitteella. Ensimmäisessä syklissä oligopramerit hybridisoituvat alkuperäisen templaatti-DNA: n kanssa ja sitten (myöhemmissä sykleissä) ja vasta syntetisoitujen DNA-molekyylien kanssa, kun ne kerääntyvät reaktioseokseen. Jälkimmäisessä tapauksessa DNA: n synteesi ei pääty johtuen lämpötilajärjestelyn muutoksesta, mutta kun se on saavuttanut monistetun alueen DNA-polymeraasirajan, joka määrittää uuden syntetisoidun DNA-alueen koon yhdelle nukleotidille.

Menetelmänä saaduille DNA-molekyyleille käytetään elektroforeesia, jonka avulla vahvistettu materiaali jaetaan amplikonien (monistustuotteet) koon mukaan.

PCR: n avulla on mahdollista suoraan tutkia putatiivisten mutaatioiden tai polymorfisten kohtien lokalisointipaikkoja ja myös tutkia DNA: n muita erityispiirteitä.

trusted-source[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

You are reporting a typo in the following text:
Simply click the "Send typo report" button to complete the report. You can also include a comment.