Lääketieteen asiantuntija
Uudet julkaisut
Polymeraasiketjureaktio (PCR) tartuntatautien diagnoosissa
Viimeksi tarkistettu: 23.04.2024
Kaikki iLive-sisältö tarkistetaan lääketieteellisesti tai se tarkistetaan tosiasiallisen tarkkuuden varmistamiseksi.
Meillä on tiukat hankintaohjeet ja vain linkki hyvämaineisiin mediasivustoihin, akateemisiin tutkimuslaitoksiin ja mahdollisuuksien mukaan lääketieteellisesti vertaisarvioituihin tutkimuksiin. Huomaa, että suluissa ([1], [2] jne.) Olevat numerot ovat napsautettavia linkkejä näihin tutkimuksiin.
Jos sinusta tuntuu, että jokin sisältö on virheellinen, vanhentunut tai muuten kyseenalainen, valitse se ja paina Ctrl + Enter.
PCR - yksi menetelmistä DNA-diagnostiikan, jonka avulla voidaan lisätä useita kopioita havaittavissa genomin osan (DNA) bakteerien tai virusten on miljoona kertaa käyttäen DNA-polymeraasia entsyymi. Testi tätä erityistä genomisen nukleiinihapposegmenttiä kerrotaan toistuvasti (monistettu), joka mahdollistaa sen tunnistamisen. Ensimmäinen DNA-molekyyli, bakteerien tai virusten kuumentamalla jaettu kaksi ketjua, niin läsnä ollessa syntetisoidun DNA-aluketta (sekvenssi nukleotidien spesifinen määritelty genomi) on sitova niitä täydentäviä DNA-jaksojen, syntetisoitiin toinen juoste nukleiinihapon jokaisen alukkeen läsnä ollessa lämmönkestävän DNA-polymeraasin . On käynyt ilmi kahden DNA-molekyylin. Prosessi toistetaan monta kertaa. Diagnoosin, vain yksi DNA-molekyyli, toisin sanoen yksi bakteeri tai viruspartikkelin. Saattamalla ylimääräinen vaihe - DNA-synteesi RNA-molekyyli käyttäen käänteiskopioijaentsyymiä - on mahdollisuus testata RNA-virusten, kuten HCV-virus. PCR - kolmivaiheinen prosessi, toistuvien denaturointi, alukkeiden pariutuminen, DNA-synteesin (polymerointi). DNA: n määrä syntetisoitu tunnistettiin ELISA: lla tai elektroforeesia.
PCR-menetelmää voidaan käyttää eri biologisen materiaalin - seerumin tai veriplasmasta, kaavinta virtsaputken, koepala, keuhkopussin nestettä, aivo-selkäydinneste, jne. Ensimmäinen PCR käytettiin infektiotautien diagnosointiin, kuten virushepatiitti B, virushepatiitti C, virushepatiitti D, CMV-infektio, tarttuvan sukupuoliteitse tarttuvien infektioiden (tippuri, roskat diynaya, mykoplasma, Ureaplasma infektio), tuberkuloosi, HIV -infektio jne.
PCR: n etuna tartuntatautien diagnoosissa muihin tutkimusmenetelmiin verrattuna on seuraava:
- tartunnan aiheuttaja löytyy mistä tahansa elimistön biologisesta ympäristöstä, mukaan lukien biopsiasta saatava materiaali;
- On mahdollista diagnosoida tartuntataudit taudin varhaisimmissa vaiheissa;
- Tutkimustulosten kvantitatiivinen arviointi on mahdollista (kuinka monta virusta tai bakteeria on tutkittavan aineiston sisällä);
- korkea herkkyys menetelmän; esimerkiksi, herkkyys PCR DNA: n toteamiseen hepatiitti B -viruksen veressä on 0,001 pg / ml (noin 4 x 10 2 kopiota / ml), kun taas herkkyys DNA-hybridisaatiolla, jossa käytetään haarautunut koettimia - 2,1 pg / ml (noin 7 x 10 5 kopiota / ml).
[