Sauzern-blottaus
Viimeksi tarkistettu: 23.04.2024
Kaikki iLive-sisältö tarkistetaan lääketieteellisesti tai se tarkistetaan tosiasiallisen tarkkuuden varmistamiseksi.
Meillä on tiukat hankintaohjeet ja vain linkki hyvämaineisiin mediasivustoihin, akateemisiin tutkimuslaitoksiin ja mahdollisuuksien mukaan lääketieteellisesti vertaisarvioituihin tutkimuksiin. Huomaa, että suluissa ([1], [2] jne.) Olevat numerot ovat napsautettavia linkkejä näihin tutkimuksiin.
Jos sinusta tuntuu, että jokin sisältö on virheellinen, vanhentunut tai muuten kyseenalainen, valitse se ja paina Ctrl + Enter.
Southern blotting (kehittänyt E. Southern ja R. Davies vuonna 1975) on tärkein menetelmä, jolla tietyn sairauden geenit tunnistetaan. Tätä varten potilaan soluista peräisin oleva DNA uutetaan ja käsitellään yhdellä restriktioendonukleaasista (tai useista). Tuloksena olevat fragmentit altistetaan elektroforeesille, mikä sallii niiden koon (pienemmät fragmentit liikkuvat nopeammin geelin huokosten kautta). Sitten fragmentit siirretään (uusitaan) nitroselluloosasuodattimelle, johon radioleimatun koetin on kerrostettu. Koetin sitoutuu vain komplementaariseen sekvenssiin. Sitten autoradiografian menetelmällä määritetään genomisen DNA: n halutun fragmentin sijainti elektroforeesilla.
Hybridisaatio leimatulla DNA-koettimen RNA: n tai DNA-valmisteita, tippua aiheutettu kiinteään matriisiin ilman rajoituksia ja elektroforeesi kutsutaan Dot ja raon hybridisaatio konfiguraatiosta riippuen DNA läiskät suodattimen (pyöreä tai pitkänomainen, vastaavasti).
[