Lääketieteen asiantuntija
Uudet julkaisut
In situ -hybridisaatio
Viimeksi tarkistettu: 04.07.2025
Kaikki iLive-sisältö tarkistetaan lääketieteellisesti tai se tarkistetaan tosiasiallisen tarkkuuden varmistamiseksi.
Meillä on tiukat hankintaohjeet ja vain linkki hyvämaineisiin mediasivustoihin, akateemisiin tutkimuslaitoksiin ja mahdollisuuksien mukaan lääketieteellisesti vertaisarvioituihin tutkimuksiin. Huomaa, että suluissa ([1], [2] jne.) Olevat numerot ovat napsautettavia linkkejä näihin tutkimuksiin.
Jos sinusta tuntuu, että jokin sisältö on virheellinen, vanhentunut tai muuten kyseenalainen, valitse se ja paina Ctrl + Enter.
Hybridisaatiomenetelmä voidaan suorittaa paitsi geelillä, suodattimilla tai liuoksessa, myös histologisilla tai kromosomipreparaateilla. Tätä menetelmää kutsutaan in situ -hybridisaatioksi. Menetelmän muunnelmaa, jossa koettimina käytetään fluorokromeilla leimattuja DNA- tai RNA-preparaatteja, kutsutaan FISH-menetelmäksi (fluoreskeiini in situ -hybridisaatio). Leimattu DNA-koetin levitetään eri tavoin värjättyihin ja hybridisaatiota varten valmistettuihin (denaturoituihin) metafaasikromosomeihin. Kromosomien esikäsittelyllä helpotetaan koettimen pääsyä genomiseen DNA:han. Kun sitoutumattomat DNA-molekyylit on pesty pois ja niihin on levitetty valoherkkä emulsio (radioaktiivista leimaa käytettäessä) tai suoritettu asianmukainen käsittely (biotiini- tai fluoreskeiinileimattuja DNA-koettimia käytettäessä), käytetyn DNA-koettimen kanssa komplementaaristen DNA-sekvenssien lokalisaatiokohdat voidaan havaita suoraan mikroskopialla tiettyjen kromosomien vastaavien osien yläpuolella olevina tunnusomaisina pisteinä.
Tämä tutkimusmenetelmä mahdollistaa paitsi kromosomaalisen kuulumisen myös tutkittavan geenin kromosomin sisäisen lokalisaation määrittämisen.
[