Immunohistokemialliset merkkiaineet suun limakalvon ja punaisen huulirajan syöpää edeltävien vaurioiden diagnosoinnissa

Suun limakalvon ja huulten kirkkaanpunaisen reunan neoplastisten leesioiden oikea-aikainen ja tehokas diagnosointi on edelleen vakava ongelma onkostomatologiassa. Suuontelon levyepiteelikarsinooma on maailman kuudenneksi yleisin pahanlaatuisten kasvainten joukossa kaikissa lokalisaatioissa. Venäjän federaatiossa suuontelon pahanlaatuisten kasvainten esiintyvyys on 2–4 % kaikista pahanlaatuisista kasvaimista ihmisillä.

Viime vuosina suun limakalvojen sairauksien rakenteessa on tapahtunut merkittäviä muutoksia, erityisesti syöpää edeltävien sairauksien osuus on kasvanut. Tässä suhteessa pahanlaatuisten kasvainten merkkien tehokas ei-invasiivinen havaitseminen on edelleen kiireellinen tehtävä hammaslääketieteessä.

Vaikka suun limakalvon ja limakalvon glukoosi-CD:n ennustavien muutosten kliininen visualisointi ulkoisen lokalisoinnin yhteydessä on näennäisesti yksinkertaista, esisyöpäsairauden nosologisen muodon määrittely pelkästään tutkimuksen ja tunnustelun perusteella johtaa usein diagnostisiin virheisiin, koska leesion jopa merkkiaineosien vaihteleva keratinisaatio- tai haavaumaaste vaikeuttaa niiden erottamista toisistaan. Pahanlaatuisen kasvaimen varhainen diagnosointi on erityisen vaikeaa, koska sen kliiniset oireet ilmenevät hieman myöhemmin kuin varsinainen pahanlaatuinen muutos.

V. P. Hartšenkon ym. tutkimukset osoittivat siis, että yli 2/3 potilaista on jo sairauden vaiheessa III–IV siihen mennessä, kun he hakeutuvat lääkäriin ja saavat diagnoosin. Yksi syy myöhäiseen hoitoon on "epäselvä" kliininen kuva taudin alkuvaiheissa. Lisäksi on osoitettu, että tarvitaan organisatorista ja metodologista työtä sekä hammaslääkäreiden tietämystä suun limakalvon syöpää edeltävien sairauksien varhaisista kliinisistä ilmentymistä. Testit osoittivat, että vain 42,8 % hammaslääkäreistä erottaa suun limakalvon syövän varhaiset ilmentymät, kun taas 4,2 % vastaajista pystyy suorittamaan oikein ensisijaiset diagnostiset toimenpiteet tämän lokalisaation syövän havaitsemiseksi.

Eri kirjoittajien mukaan diagnostisten virheiden aiheuttamien parantumattomien suun limakalvosyöpämuotojen osuus on 58,4–70 %. Tilannetta monimutkaistavat syöpää edeltävien sairauksien kliinisen diagnostiikan ratkaisemattomat kysymykset, erityisesti pahanlaatuisuuden alkamisen erottamisen vaikeudet sekä syöpää edeltävän sairauden hoitomenetelmän valintaongelmat. Biopsialle ei ole absoluuttisia ja suhteellisia indikaatioita, varsinkaan konservatiivisen hoidon vaiheissa. Tähän mennessä kirjallisuudessa ei ole yhtäkään esimerkkiä kliinisen tason diagnostisesta kriteeristä, johon hammaslääkäri voisi viitata valitessaan riittävää hoitomenetelmää tietyn syöpää edeltävän sairauden hoitoon.

Useimmat kirjoittajat näkevät diagnostisten vaikeuksien ratkaisun apumenetelmissä (sytologinen tutkimus, keilostomatoskopia, biomikroskopia, optinen koherenssitomografia). Nämä menetelmät ovat kuitenkin melko subjektiivisia, koska ne kuvaavat vain kvalitatiivisia muutoksia sairastuneissa kudoksissa. Yksi morfologisten muutosten kvantitatiivisen arvioinnin menetelmistä on immunohistokemiallisten markkerien määrittäminen.

Nykyaikaisten kasvainten varmennusmenetelmien käyttöönotto jokapäiväisessä käytännössä on parantanut merkittävästi pahanlaatuisten kasvainten diagnostiikan ja hoidon laatua. Nykyaikaisen molekyylionkologian metodologiset ominaisuudet ovat laajentuneet; tällä hetkellä immunohistokemiallisen tutkimuksen avulla on mahdollista paitsi määrittää kasvaimen histologinen diagnoosi, myös antaa sen morfofunktionaaliset ominaisuudet aggressiivisuuden ja ennusteen suhteen suhteessa syöpää edeltäviin leesioihin ja jo kehittyneeseen onkologiseen sairauteen.

Nykykäsitysten mukaan solujen pahanlaatuinen transformaatio perustuu yhden tai useamman solun onkogeenin tai suppressorigeenin aktivoitumiseen. Sitä havaitaan 30 %:ssa ihmisen syöpätapauksista, ja monissa tapauksissa se voidaan havaita immunohistokemiallisesti. Onkogeenejä ras p21, HER2/neu, bcl-2 sekä suppressorigeenejä p53 ja Rb on tutkittu useissa eri kasvaimissa. Jotkut luetelluista onkogeeneistä (ja suppressorigeeneistä) ovat itsenäisiä ennusteellisia ja prediktiivisiä ominaisuuksia.

Suun limakalvon epiteeli on syöpäkasvainten muodostumisen alkupiste. Ulkoiset tekijät (traumaattiset purentasolmukkeet, täytteiden terävät reunat, huonosti toimivat ortopediset rakenteet, irrationaalinen yksilöllinen suuhygienia, tulehduksellisesti tuhoavat parodontaaliset vauriot) sekä geneettiset (perinnölliset) tekijät voivat olla ratkaisevassa roolissa tämän lokalisaation syövän syntymisessä. Epiteelin hyperplasian ja levyepiteelimetaplasian säätelymekanismien vauriot voivat olla osallisina suun limakalvon levyepiteelisyövän kehittymisessä.

Suun limakalvon epiteelin morfologiset piirteet pahanlaatuisuuden prosessissa liittyvät muutoksiin erilaistumismarkkereiden joukossa (pääasiassa epiteelikerroksen sytokeraattifenotyyppi), CEA:n ilmentymisessä sekä proliferaatiomarkkereissa Ki-67.

P53 on kasvainsuppressorigeeni, jonka proteiinituote on tumatranskriptiotekijä, jolla on monia toimintoja, mukaan lukien solujen kulun estäminen solusyklin läpi ja apoptoosin indusointi. p53-proteiinia ilmentyy kaikissa kehon soluissa. Ilman geneettisen laitteen vaurioita p53-proteiini on inaktiivinen, ja kun DNA-vaurio tapahtuu, se aktivoituu. Aktivaatio koostuu kyvyn saavuttamisesta sitoutua DNA:han ja aktivoida sellaisten geenien transkriptio, jotka sisältävät nukleotidisekvenssin säätelyalueella, jota kutsutaan p53-vaste-elementiksi. p53:n mutaatio, jota esiintyy noin 50 %:ssa syöpäkasvaimista, johtaa proteiinin synteesiin, jolla on toimintojen menetys, mutta jolla on korkea stabiilius ja joka kertyy tumaan, ja joka immunohistokemiallisesti ilmentyy erillisenä ydinvärjäyksenä.

"Villi" tyyppi wt-53-kasvainsuppressorigeenillä ja sen koodaamalla p53-proteiinilla on keskeinen rooli apoptoosin kehittymisessä. Kun DNA vaurioituu, wt53-geeni ja vastaava proteiini ilmentyvät. Jälkimmäinen estää solusyklin G1-S-vaiheessa ja estää siten vaurioituneen DNA:n, jota syntetisoidaan S-vaiheessa, lisääntymistä ja luo olosuhteet vaurioituneen kohdan poistamiselle ja sen muuttuneen osan korjaamiselle. Jos korjaus tapahtuu, solu jatkaa jakautumista ja tuottaa terveitä soluja. Jos korjausta ei kuitenkaan tapahdu, aktivoituvat muut mekanismit, jotka varmistavat vaurioituneen (mutageenisen) DNA:n omaavan solun tuhoutumisen, eli kehittyy solukuoleman geneettinen ohjelma, apoptoosi.
Viimeaikaiset tutkimukset ovat viitanneet siihen, että p53-status voi olla ratkaiseva tekijä kasvaimen herkkyyden määrittämisessä kemo- ja sädehoidolle. Tätä oletusta tukevat lukuisat tutkimukset, jotka osoittavat, että mutatoitunut p53 on tekijä huonossa ennusteessa ja adjuvanttihoidon tehottomuudessa suun limakalvon erilaisissa kasvaimissa.

Proliferaatiomarkkereilla on myös erittäin informatiivinen diagnostinen arvo pahanlaatuisten kasvainten kulun ennustamisessa. Proliferatiivinen aktiivisuus on johtava tekijä sekä pahanlaatuisten solujen transformaation mekanismissa että jo syntyneiden kasvainten biologisessa käyttäytymisessä. Lupaava proliferatiivisen aktiivisuuden markkeri on Ki-67-antigeeni, jota ilmentyy lähes kaikissa solusyklin vaiheissa ja joka heijastaa vastaavasti proliferatiivisen poolin kokoa. Ki-67:ää koodaava geeni sijaitsee kromosomin 10 pitkällä haaralla. Ki-67 on säätelyproteiini. Sen ilmaantuminen osuu samaan aikaan solun siirtymisen kanssa mitoosiin, mikä mahdollistaa sen käytön yleismaailmallisena proliferaatiomarkkerina pahanlaatuisten kasvainten kasvun arvioinnissa.

Useissa tutkimuksissa on selvitetty immunohistokemiallisten markkereiden diagnostista arvoa suun limakalvon ja sen vermilion reunan syöpää edeltävien vaurioiden kulun ennustamisessa. Murti PR ym. tutkivat p53:n ilmentymistä suun limakalvon punajäkälässä. p53:n ilmentymisen immunohistokemiallinen määritys ei paljastanut suun limakalvon syöpää edeltävän vaiheen pahanlaatuisuutta. Kirjoittajat ehdottivat, että p53:n hyperekspression huippu on ajallisesti lähellä syöpää edeltävän vaiheen muuttumista syöväksi, eikä sitä voida käyttää varhaisena markkerina suun limakalvon syöpää edeltävän vaiheen pahanlaatuisuuden ennustamisessa. Muut tutkijat ovat havainneet, että ihmisen TP53-geeni koodaa ainakin 9 eri isoformia. Toinen p53-perheen jäsen, p63, sisältää 6 eri isoformia ja sillä on keskeinen rooli suun limakalvon, sylkirauhasten, hampaiden ja ihon kehityksessä. On ehdotettu, että p63 liittyy pään ja kaulan levyepiteelisyövän kehittymiseen. Tilastollisesti merkitseviä muutoksia uusien p53- ja p63-isoformien ilmentymisessä suun limakalvon syöpää edeltävässä vaiheessa verrattuna muuttumattomaan kudokseen ei kuitenkaan havaittu. De Sousa FA:n tutkimukset vahvistivat p53-markkerin ennusteellisen merkityksen suun limakalvon esiasteiden pahanlaatuisen transformaation potentiaalin määrittämisessä. Samaan aikaan jotkut kirjoittajat uskovat, että p53:a ei voida käyttää ainoana markkerina syövän kehittymisen ennustamiseen.

Ennusteen kannalta yhtä lupaava on podoplaniinin immunohistokemiallinen havaitseminen tutkittavista kudosnäytteistä. Podoplaniini on integraalinen kalvomukoproteiini, jota ilmentävät sekä muuttumattomat että tulehduksellisesti muuttuneet ja neoplastiset imusuonten endoteelisolut. Tutkijat havaitsivat tilastollisesti merkitsevän yhteyden podoplaniinin ja ABCG2:n (ATP:tä sitova proteiini, alaryhmä G2) ilmentymisen ja punajäkälän pahanlaatuisen transformaation riskin välillä (riski oli merkittävästi suurempi podoplaniinin ja ABCG2:n samanaikaisen ilmentymisen yhteydessä kuin ilman podoplaniinin ja ABCG2:n samanaikaista ilmentymistä) ja päättelivät, että podoplaniinia ja ABCG2:ta voidaan käyttää biomarkkereina suun limakalvon pahanlaatuisen transformaation riskin arvioimiseksi syöpää edeltävissä tilanteissa.

Ulkomaisten tutkijoiden tutkimukset ovat vahvistaneet Fas/FasL-ekspression diagnostisen merkityksen suun limakalvosyövän kehittymisen biomarkkereina. Fas on tyypin I transmembraaninen glykoproteiini (synonyymit APO-I, CD95) ja indusoi solun apoptoosin vuorovaikutuksessa Fas-ligandin (FasL) tai Fas-agonististen monoklonaalisten vasta-aineiden kanssa.

Samaan aikaan tiedetään, että Fas-reseptoria ilmentyy lähes kaikissa kudostyypeissä. Fasin lisääntynyttä ilmentymistä havaitaan munuaisissa, maksassa, sydämessä ja kateenkorvassa. Lisäksi tätä reseptoria ilmentyy monissa kasvaimissa sekä virustartunnan saaneissa soluissa. Syynä eri solutyyppien resistenssiin Fas-riippuvaiselle apoptoosille voi olla näiden solujen lisääntynyt liukoisen Fas-proteiinin tuotanto. Liukoinen Fas on vaihtoehtoisen silmukoinnin tuote ja kykenee estämään agonististen monoklonaalisten vasta-aineiden indusoimaa apoptoosia Fas- tai FasL-reseptoria vastaan.

Siten eri kirjoittajien tekemien tutkimusten tulosten epäselvä tulkinta antaa meille mahdollisuuden päätellä, että molekyylionkologian nykyisessä kehitysvaiheessa immunohistokemiallisten markkereiden käyttö on lupaavaa yhdessä muiden suun limakalvon syöpää edeltävien leesioiden diagnoosi- ja ennustemenetelmien kanssa.

Immunohistokemiallisten markkerien diagnostisen merkityksen mukainen luokittelu on erityisen tärkeää. Uskomme, että ne voidaan järjestää laskevassa merkityksen järjestyksessä seuraavaan järjestykseen:

1. Diagnostisesti merkittävät immunohistokemialliset markkerit: podoplaniini, ABCG2, bcl-2;
2. Kohtalaisen diagnostisen merkityksen omaavat immunohistokemialliset markkerit: Bax, MMP-9;
3. Lupaavia immunohistokemiallisia markkereita, joiden diagnostinen merkitys vaatii lisätutkimuksia: MMP-2, MT1-MMP, Fas/FasL;
4. Immunohistokemialliset markkerit, joiden diagnostista merkitystä syöpää edeltävien sairauksien ennustamisessa ei ole osoitettu: p53, p63.

Kirjallisuusaineiston analyysin perusteella voidaan päätellä, että immunohistokemiallisten markkereiden määrittämistä ei pidä pitää ainoana menetelmänä suun limakalvon syöpää edeltävien sairauksien kulun ennustamiseksi ja pahanlaatuisen transformaation riskin asteen tunnistamiseksi, mutta menetelmällä on kuitenkin korkea diagnostinen arvo yhdistettynä muihin syöpää edeltävien sairauksien kulun ennustamiseen tarkoitettuihin menetelmiin.

Vanhempi tutkija Kuznetsova Roza Gilevna. Immunohistokemialliset markkerit suun limakalvon ja huulten punareunan syöpää edeltävien vaurioiden diagnostiikassa // Käytännön lääketiede. 8 (64) Joulukuu 2012 / Nide 1

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]