Konfokaalimikroskopia

Confocal-mikroskopiaa pidetään nyt yhtenä lupaavimmista ihon kuvantamismenetelmistä in vivo, joten sen kiinnostus sekä lääkäreiden että tieteellisten tutkimuslaitosten edustajien joukossa on epätavallisen korkea.

[1], [2], [3], [4], [5]

Confocal mikroskopiaominaisuudet

Dermatologiassa konfokaalinen lasermikroskopia käytetään:

• tutkia yhdisteiden tunkeutumista ihoon (tunkeutumisreitit, kinetiikka, ihon jakautuminen);
• rauhasten tarkkailu (aktiivisen ja passiivisen tilan määritelmä);
• mikrokytkentäpohjan tutkimukset (myös reaaliajassa);
• kasvainten diagnoosi.

Ilman keskustelua edellä mainittujen konfokaalimikroskopian lajikkeiden ansioista ja haitta-aineista huomaamme, että viime vuosina fluoresenssi-laser-konfokaalimikroskopia on kasvanut suosion myötä.

[6], [7], [8], [9],

Konfokiomikroskopia ihokokeessa

Konfokaalimikroskopia tarjoaa kaksi arvokasta mahdollisuuksia - tutkimus kudosten solutasolla tilassa fysiologisen elämän ja mielenosoituksia tutkimustulosten (eli solujen toimintaa ..) neljässä ulottuvuudessa - korkeus, leveys, syvyys ja aika. Kuvanlaadun ja syvyyden kannalta tärkeintä on kudoksen kyky välittää valoa, toisin sanoen sen läpinäkyvyyttä. Konfokaalimikroskopian menetelmä ei ole kontaktissa, valonsäde ei aiheuta haittaa tai epämukavuutta potilaille tai koeeläimelle.

Ihon tutkimiseksi käytetään konfokaaalisen pyyhkäisyn lasermikroskopiaa (CSLM). Menetelmällä näet ihon ja papillary dermis -kerroksen, jonka resoluutio on lähellä histologista. Kaikki kyselyn tulokset näkyvät näytöllä ja tallennetaan kuvatiedostojen pakettina (mikrofilminä (dynaamisina) tai mikroprofiileina).

On olemassa kahdenlaisia menetelmiä:

• Heijastava (heijastuskyky CSLM) - perustuu siihen, että eri solunsisäisten ja solunsisäisten rakenteiden erilaisella valon taitekerralla on mahdollista saada kontrasti.
• Fluorescent (fluoresenssi CSLM) - käyttää laservalon tunkeutuu ihon ja stimuloi sen tai ekso endohromofory vastanneista alkaa päästää fotoneja (eli fluoresoivat ..).

Sivusuuntainen resoluutio on vaakatasossa sijaitsevien pisteiden välinen vähimmäisetäisyys, ts. Taso, joka on yhdensuuntainen ihon pinnan kanssa. Aksiaalinen resoluution on vähimmäisetäisyys pisteiden välillä, jotka sijaitsevat tasossa, joka on kohtisuorassa ihon pinnalle.

[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16], [17], [18]

Konfokaalisen mikroskopian historia

Ajatus luodaan mikroskooppi, joka pystyy solutasolla näyttämään intravitaalisen leikkauksen elävästä kudoksesta, kehitettiin aktiivisesti 130 vuotta sitten. Nykyaikaisten mikroskoopien tärkein elementti suunniteltiin XIX vuosisadan lopulla ja se oli pyörivä levy, jossa pienimmät reiät olivat spiraalimaisesti sijoitettuja. Tämän levyn keksittiin vuonna 1883 saksalainen opiskelija Paul Nipkov, jonka kunniaksi hän sai nimensä - Nipkov-levy (tai nipkov-levy). Keksinnön perustui kyky läpi kulkevan valon pienen reiän levyn ja suurentava linssi, tunkeutua kudokseen syvyys ja kattavuus solufragmentti etäisyyden päässä pinnasta. Kun levy kiertää nopeasti, palaset lisätään kokonaiskuvaksi. Poistamalla tai lähentämällä rakennetta kohteeseen, tutkittavan kudoksen optisen osan syvyyttä voidaan vaihdella.

Ainoastaan 1980-luvun VTR: n tuloineen ja kuvankäsittelyn omaavilla tietokoneilla 1990-luvun alussa oli todellinen tilaisuus luoda ja soveltaa tehokkaasti niitä nykyaikaisia mikroskooppeja, joita käytetään aikanamme.