C-hepatiitti PCR

HCV:tä ei yleensä esiinny materiaalissa.

Toisin kuin virushepatiitti C:n serologiset diagnosointimenetelmät, jotka havaitsevat HCV-vasta-aineita, PCR mahdollistaa HCV-RNA:n läsnäolon havaitsemisen suoraan ja sen pitoisuuden kvantifioinnin testimateriaalissa. Testillä on lajispesifisyys ja korkea herkkyys: kymmenen HCV-RNA-molekyyliä testimateriaalissa riittää sen havaitsemiseen. HCV-vasta-aineiden havaitseminen vahvistaa vain potilaan infektion tosiasian, mutta ei mahdollista arvioida infektioprosessin aktiivisuutta (viruksen replikaatiota) eikä taudin ennustetta. Lisäksi HCV-vasta-aineita havaitaan sekä akuuttia että kroonista hepatiittia sairastavien potilaiden veressä että niillä potilailla, jotka olivat sairaita ja toipuneet, ja usein veressä olevat vasta-aineet ilmestyvät vasta useita kuukausia taudin kliinisen kuvan alkamisen jälkeen, mikä vaikeuttaa diagnoosia. HCV:n havaitseminen verestä PCR:llä on informatiivisempi diagnostinen menetelmä. HCV-RNA:n havaitseminen PCR:llä osoittaa viremiaa, mahdollistaa viruksen replikaation arvioinnin elimistössä ja toimii yhtenä antiviraalisen hoidon tehokkuuden kriteereistä. HCV-RNA:n havaitseminen PCR:llä virusinfektion varhaisvaiheissa ilman mitään serologisia markkereita voi toimia varhaisimpana todisteena infektiosta. HCV-RNA:n erillinen havaitseminen ilman muita serologisia markkereita ei kuitenkaan voi täysin sulkea pois väärää positiivista PCR-tulosta. Tällaisissa tapauksissa tarvitaan kattava kliinisten, biokemiallisten ja morfologisten tutkimusten arviointi ja infektion läsnäolon toistuva vahvistaminen PCR:llä.

PCR-menetelmän käyttö kroonista virushepatiitti C:tä sairastavilla potilailla on erittäin tärkeää, koska useimmilla heistä ei ole korrelaatiota viruksen replikaation ja maksaentsyymien aktiivisuuden välillä. Tällaisissa tapauksissa vain PCR mahdollistaa viruksen replikaation läsnäolon arvioimisen, varsinkin jos lopputulos ilmaistaan kvantitatiivisesti. Useimmissa tautitapauksissa HCV-RNA:n katoaminen veriseerumista tapahtuu myöhemmin kuin maksaentsyymien normalisoituminen, joten niiden normalisoituminen ei voi olla perusta antiviraalisen hoidon lopettamiselle.

Käytännössä on tärkeää tutkia PCR-menetelmällä paitsi veriseerumia, myös lymfosyyttejä ja maksabiopsianäytteitä HCV-RNA:n havaitsemiseksi. Viruksia voidaan havaita maksakudoksessa 2–3 kertaa useammin kuin veriseerumissa. HCV-RNA:n veriseerumitestin tuloksia arvioitaessa on muistettava, että viremia voi vaihdella luonteeltaan (samoin kuin entsyymiaktiivisuus). Siksi positiivisen PCR-testituloksen jälkeen voidaan saada negatiivinen tulos ja päinvastoin. Tällaisissa tapauksissa on parempi tutkia maksabiopsianäytteet mahdollisten epäilysten selvittämiseksi.

HCV-RNA:n havaitsemista materiaalista PCR:llä käytetään seuraaviin tarkoituksiin:

• kyseenalaisten serologisten testitulosten ratkaiseminen;
• viruksen hepatiitti C:n erottaminen muista hepatiittimuodoista;
• taudin akuutin vaiheen tunnistaminen verrattuna edelliseen infektioon tai kontaktiin; HCV-seropositiivisten äitien vastasyntyneiden infektiovaiheen määrittäminen;
• antiviraalisen hoidon tehokkuuden seuranta.

Potilaat, joilla epäillään virushepatiitti C:tä:

• lahjoittajat;
• riskitekijöitä omaavat henkilöt;
• henkilöillä, joilla on kohonnut ALAT-aktiivisuus;
• akuuttia hepatiittia sairastavat potilaat

Kaikki edellä mainitut HCV:n PCR-diagnostiikan tulosten arvioinnin ja lähestymistapojen ominaisuudet koskevat myös muita infektioita.

PCR-menetelmä mahdollistaa paitsi HCV-RNA:n havaitsemisen tutkittavassa materiaalissa myös sen genotyypin määrittämisen. Viruksen genotyypin määrittäminen on erittäin tärkeää kroonista virushepatiitti C:tä sairastavien potilaiden valinnassa interferoni-alfa- ja ribaviriinihoitoon. Kroonisen virushepatiitti C:n hoidon interferoni-alfalla laboratorioindikaatiot ovat seuraavat:

• lisääntynyt transaminaasi-aktiivisuus;
• HCV-RNA:n esiintyminen veressä;
• HCV-genotyyppi 1;
• korkea viremia veressä (yli 8 × 105 ^kopiota /ml).

^{Tällä hetkellä on mahdollista määrittää kvantitatiivisesti HCV -} RNA-pitoisuus veriseerumissa PCR-menetelmällä, jolla on suuri merkitys interferoni alfa -hoidon seurannassa. Viremian taso arvioidaan seuraavasti: HCV-RNA-pitoisuuden ollessa 102–104 kopiota / ^ml - heikko; ^105–107 kopiota/ml - keskimääräinen, yli ^108kopiota /ml - korkea. Tehokkaan hoidon myötä viremian taso laskee.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]