Hepatiitti B -virus

Hepatiitti B on tarttuva tauti henkilölle, jolle on tunnusomaista viruksen aiheuttamat maksaan kohdistuvat selektiiviset vauriot. Tämä hepatiitin muoto on kaikkein vaarallisin seurauksin kaikkien tunnettujen viruksen hepatiittiformien joukossa. Sen aiheuttaja on hepatiitti B -virus (HBV).

Ensimmäinen antigeeni hepatiitti B virus on havaittu B. Blumberg 1964 seerumin Australian aborigine, ja taudinaiheuttajan todettiin vuonna 1970, D. Dane (et ai.), Ja sai nimen Dane hiukkasia, koska ei ollut varmaa, että , että tämä on todellakin virus eikä sen komponentteja. Tämän jälkeen kaikki epäilykset hävisivät, koska Dane-partikkeleissa havaittiin genominen DNA ja viruksen DNA-riippuvainen DNA-polymeraasi. Virioni sisältää kolme pääasiallista antigeenia, joille on annettu seuraavat nimitykset vuonna 1974:

• HBsAg on pinnallinen tai liukoinen tai australialainen antigeeni.
• HBcAg on ydinantigeeni (ko-antigeeni).
• HBeAg - e-antigeeni, on lokalisoitu ydin virionin ja, toisin kuin HBcAg, ei ole vain läsnä virionin, mutta myös verenkierrossa vapaassa muodossa tai kompleksina anti-HBeAg. Se erittyy verta hepatosyyteistä HBV: n aktiivisella replikaatiolla.

Pinta-antigeeni - HBsAg - esiintyy kolmen morfologisesti erilaisen muunnelman muodossa: 1) edustaa koko virionin superkapsidia; 2) suuria määriä tapahtuu partikkeleina, joiden läpimitta on 20 nm ja joilla on pallomaiset muodot; 3) filamenttien muodossa, joiden pituus on 230 nm. Kemiallisesti ne ovat identtisiä. Koostumuksen on yhteensä HBsAg-antigeenin ja kaksi paria toisiaan poissulkevia tyyppi-determinantit: d / y ja w / r, joten on neljä suurta alatyypin HBsAg (ja siten HBV): adw, adr, ayw ja AUR. Antigeeni a muodostaa yhteisen ristikkomahdollisuuden kaikille viruksen alatyypeille.

Itse asiassa virion, Dain-partikkelin, on pallomainen muoto ja halkaisija 42 nm. Virion superkapsidi koostuu kolmesta proteiinista: pää (pää), suurista ja keskisuurista. Genomi on suljettu kapsidiksi ja sitä edustaa kaksijuosteinen rengasmainen DNA, jonka massa on 1,6 MD. DNA koostuu noin 3200 nukleotidista, mutta sen "plus" on 20-50% lyhyempi kuin miinusmerkki. Pitkän filamentin 5'-päällä viruskohtainen proteiini sitoutuu kovalenttisesti. Molempien säikeiden 5'-päät ovat komplementaarisia ja muodostavat "tahmeita" sekvenssejä, joiden pituus on 300 nukleotidia, niin että filamentit suljetaan renkaaseen. G + C: n pitoisuus virion DNA: ssa on 48-49 mooliprosenttia. Virion ytimeen on olemassa genomisen DNA-viruksen DNA-riippuvainen DNA-polymeraasi. HBV: n "miinus" -define-DNA sisältää vain neljä geeniä (S, C, P ja X), mutta ne on järjestetty hyvin suppeasti. Geenit S, C, P, X ovat voimakkaasti päällekkäin ja ohjaavat seuraavien tuotteiden synteesiä. Gene S koodaa päällysteproteiinin synteesiä ja sisältää kaikki tiedot HBsAg: n pinta-antigeenistä. Lisäksi se koodaa keskisuurten ja suurten kirjekuoriproteiinien synteesiä. Proteiinit sisältävät yhteisen COOH-terminaalin, mutta niiden käännös alkaa kolmella eri aloituskodonilla. Gene C koodaa kapsidiproteiinien synteesiä (HBcAg ja HBeAg); vaikka nämä proteiinit on koodattu yhdellä geenillä, niiden kääntämisen tapoja ovat erilaiset. Gene P on suurin. Se sisältää osan kolmesta muusta geenistä ja koodaa viruksen replikaatiolle välttämättömät entsyymit. Erityisesti se koodaa käänteistranskriptaasia, entsyymin RNA-ase H: n, "miinus" -ketjun 5'-terminaalisen proteiinin domeeni. Gene X koodaa proteiineja, jotka säätelevät kaikkien viruksen geenien ekspressiota (ekspressiota) ja erityisesti proteiinia, jonka massa on 17 kD, joka on geenitranskriptio-transaktivaattori.

Proteiinit, jotka muodostavat pinta-antigeenin, esiintyvät glykosyloidussa (gp) ja ei-glykosyloituneessa muodossa. Glykosyloidut ovat gp27, gp33, gp36 ja gp42 (numerot on merkitty m kD: ssä). Supercapsid HBV koostuu pää- tai perus-S-proteiinista (92%); keskimääräinen M-proteiini (4%) ja suuri tai pitkä L-proteiini (1%).

• Pääproteiini, p24 / gp27 tai pääproteiini (proteiini S) on HBV-verhon pääkomponentti. Muiden kuoriproteiinien puuttuessa se polymeroi ja muodostaa pallomaisia hiukkasia, joiden läpimitta on 20 nm, joka koostuu 100 polypeptidimolekyylistä.
• Suuri proteiini, p39 / gp42 tai pitkä proteiini (L-proteiini), on läsnä kaikissa HBsAg: n kolmessa muodossa. Se on tärkeä rooli virion morfogeneesissa ja niiden poistumisessa solusta. L-proteiini sisältää proteiinin M sekvenssin, jota täydennetään N-terminaalilla S-geenin npe-Sl-alueen koodaamien aminohappotähteiden 108 (ayw) tai 119 (adw, adr, ayr) sekvensseillä.
• Keskimmäinen proteiini - gp33 / gp36 tai proteiini M on myös läsnä kaikissa HBsAg: n kolmessa morfologisessa muodossa. Proteiini M sisältää N-terminaalissa 55 aminohappotähteen alue, jota koodaa S-geenin pre-52-alue. Oletetaan, että tällä sivustolla on tärkeä merkitys hepatiitti B -viruksen tunnistamisessa rajoitetun isäntäalueen (ihmisen, simpanssin apinan) maksasoluissa. S-geenin npe-S-alueiden koodaamilla proteiinisekvensseillä on korkea immunogeenisuus ja niiden determinantit sijaitsevat virionin pinnalla. Siksi vasta-aineilla näitä antigeenejä vastaan on tärkeä rooli hepatiitti B: n immuniteetin muodostumisessa.

Virusproteiinien synteesiä valvotaan tiukasti transkription ja translaation tasolla. Viruksen genomin transkriptiossa syntetisoidaan kahden tyyppisiä mRNA: ia:

• pienempi - 2100 nukleotidiä - koodaa kalvon pää- ja keskiproteiinit;
• suuret - 3 500 nukleotidia, eli pidempi kuin itse genominen DNA; se sisältää 100 nukleotidin pituisia terminaalisia toistoja.

Tällainen mRNA koodaa kapsidiproteiinia ja P-geenin tuotteita, ja se on myös templaatti viruksen DNA-replikaatiolle. Genomin osana on tehostimia (transkription tehostajia) - säätelyelementtejä, jotka aktivoivat kaikkien virusgeenien ilmentymisen ja toimivat pääasiassa maksasoluissa. Erityisesti geeni S ilmaistaan erittäin korkealla tasolla vain maksasoluissa ja steroidihormonien vaikutuksesta. Tämä seikka selittää miksi krooninen hepatiitti B ja maksasyöpä (hepatooma) havaitaan miehillä useammin kuin naisilla, joilla on alhaisempi steroidihormonitaso.

Hepatiitti B -viruksen muut sääntelyelementit moduloivat (ohjaavat) yksittäisten proteiinien synteesiä. Esimerkiksi suuri proteiini syntetisoidaan vain pieninä määrinä. Suurin osa tartunnan virion pinnalla. Ja tärkein proteiini ja vähemmässä määrin keskimmäinen proteiini syntetisoidaan valtavissa määrissä ja jätetään solut pinta-antigeenipartikkeleihin, jotka seerumissa sisältävät monta kertaa enemmän kuin kypsät virionit. Pinta-antigeenihiukkasten lukumäärä voi olla 1011 - 1013 per 1 ml verta (useita satoja μg).

Hepatiitti B -virus eristetään uudessa virusryhmässä - Hepadnaviridae, suku Orthohepadnavirus. Samanlaisia hepadnaviruksia löytyi useista eläimistä (maa-proteiinit, marmotit, pelimerkit, Peking-ankkoja).

Hepadnavirusten kopiointi tapahtuu epätavallisella tavalla. Erityisesti genomisen DNA: n replikaatio tapahtuu väliliikenteen RNA: n, eli käänteistranskriptiomekanismin kautta.

Hepatiitti B -viruksen elinkaari.

• Adsorptio solussa.
• Tunkeutuminen soluun reseptorivälitteisen endosytoosin avulla (reunustaa pit -> rajautuu pullo -> lysosomiin -> nukleokapsidin poistuminen ja tuloa virusgenomin maksasolujen tumaan).
• Solunsisäinen lisääntyminen.

Soluun tunkeutumisen aikana lyhyt ("plus") DNA-ketju puristuu (täydentää). Solussa solu-DNA: sta riippuvainen RNA-polymeraasi syntetisoi RNA: n, jossa on 3 500 nukleotidia (pregenejä) ja pienempiä mRNA: ita virusproteiinien synteesiin. Sitten pregene ja viruksen DNA-polymeraasi pakataan uudeksi syntetisoituun kapsidiin, joka siirretään sytoplasmaan. Tässä esiintyy pregenoman käänteistranskriptio. Se syntetisoi uuden "miinus" -dekoodaisen DNA: n. Miinus-DNA: n synteesin loppuun saattamisen jälkeen pregnomi-RNA tuhoutuu. Viruksen DNA-polymeraasi "miinus" -ketjussa syntetisoi "plus" -ketjun. Virustekninen DNA, joka on nyt kaksisäikeinen, voi esiintyä solussa melko pitkään ja palata ytimeen seuraavalle kopiointisyklille. Jos uusi virus hiukkanen ei kohdistu edelleen replikaation, nukleokapsidi on muodostettu läpi solukalvon, katettu superkapsidom silmujen solusta, ja se on heti pysähtyi laajentaminen "plus" ketjun DNA: ta. Siksi tämän säikeen pituus vaihtelee. Tyypillinen akuutti hepatiitti B serologisten markkereiden seuraavat peräkkäin esiintyvät veressä: HBsAg, HBeAg ja vasta-aineet (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg ja anti-HBsAg.

Koostumus hepatiitti B -viruksen on onkogeeni, mutta todettiin, että tunkeutumisen solun kromosomiin (sen eri osissa), virus-DNA voidaan indusoida niitä eri geneettisen säätö - poistetaan, translokaatio, vahvistus, joka voi aiheuttaa kehitystä maksasyövän - yksi viruksen hepatiitti B: n vakavimmista seurauksista.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Hepatiitti B -viruksen resistenssi

Hepatiitti B -virus on erittäin kestävä. Huoneenlämmössä se pysyy elinkelpoisena 3 kuukautta jäädytettynä - useita vuosia. Virus inaktivoituu täydellisesti autoklavoimalla (120 ° C) palautusjäähdyttäen 30 minuuttia, jossa on kuivaa lämpöä lämpötilassa 180 "C: ssa 60 min, 60 ° C: ssa -. Varten 10 tuntia kestävä happamassa, mutta tuhoutuu alkalisessa. Virus kuolee käsiteltäessä H202: lla, klooriamiinilla, formaliinilla, fenolilla ja UV-säteilytyksellä.

Hepatiitti B: n patogeneesi ja oireet

Virus hematogeenisesti ruiskutetaan suoraan maksaan. Hepatiitin patogeneesissä on autoimmuunin humoraalisissa ja soluvasteissa tärkeä rooli. Oletetaan, että hepatosyyttien johtuva häviö ei niin paljon, että suora toiminta itse viruksen, mutta isännän immunologisia reaktioita, jotka tapahtuvat yhteydessä muutokseen solukalvon virusproteiinien, jotka indusoivat autovasta-aineiden esiintymistä maksan soluja. Siksi kroonisen hepatiitin ja maksakirroosin kehittymistä voidaan pitää autoimmuunisairauksena.

Solukalvon autoimmuunireaktioita hepatosyyttimembraanissa olevista virusproteiineista välittää T-sytotoksiset lymfosyytit ja muut maksa-tappajasolut. Siksi maksan akuuttia dystrofiaa voidaan pitää erityisenä heterograftin hylkimisreaktiona.

Inkubaatioaika kestää 45 - 180 päivää, keskimäärin 60-90 päivää. Hepatiitti B: n kliinisessä kulkuvaiheessa on suuri vaihtelu; tauti voi esiintyä: latentissa muodossa, havaittavissa vain laboratoriomenetelmien, tyypillisessä muodossa ikteerisessä ja pahanlaatuinen sairaissa päättyy. Esiaikainen vaihe vaihtelee päivästä toiseen useita viikkoja. Ikteerisessä aika on yleensä pitkä ja on ominaista hyvin määritelty oireita (keltaisuus, hyperbilirubinemiaan, tumma virtsa, keltaisuus kovakalvon). Pitkittynyt muoto havaitaan 15-20%: lla potilaista ja 90% heistä kehittyy krooninen hepatiitti B Potilaat, joilla on krooninen muoto havaitaan usein autoimmuuniprosesseista mukana on suuri pitoisuus protivopechenochnyh vasta-aineita, havaitaan entsyymi-immunologisella määrityksellä (IPM). Lapsilla hepatiitti B on lievä ja usein ilman keltaisuutta pienissä lapsissa - enimmäkseen oireettomia.

Postinfectious koskemattomuus (humoraalisen ja soluvälitteisen) pitkä, käyttöikä johtuu neutraloivaa vasta-ainetta (anti-HBsAg) ilman pinta-antigeenin veressä. Usein havaittiin piilevä immunisaatio johtuen toistuvasta kosketuksesta HBV: n kanssa, mikä on syynä laajaan immuniteettiin virukseen väestön keskuudessa. Yleensä potilaat, joilla on akuutti B-hepatiitti, palautuvat kokonaan vasta-aineiden kertyessä siihen. Kuitenkin joissakin tapauksissa veren viruksen antigeenin korkeasta tasosta huolimatta (sellainen seikka, jossa selitetään, miksi parenteraalinen infektio esiintyy useimmiten), vasta-aineita ei tuoteta. Virus pysyy maksassa, ja henkilö pitkään, joskus elämästä, tulee krooninen kantaja. Tämä seikka liittyy luonnollisesti heikkoon immuunivasteeseen. Yksi kroonisen hepatiitti B: n yleisimmistä seurauksista on maksakirroosi ja maksasyöpä, jotka kehittyvät 30-50 vuoden piilevän ajanjakson jälkeen.

Hepatiitti B: n epidemiologia

Hepatiitti B -viruksen aiheuttaman infektion lähde on vain henkilö. Toisin kuin edellinen esityksiä, että hepatiitti B -viruksen tapahtuu yksinomaan parenteraalisesti, on nyt todistettu, että se esiintyy eri eritteiden ja ulosteiden :. Syljen, nenänielun eritteet, ulosteet, kyynelnesteen, siemennesteen, kuukautiskierron veri, jne. Näin ollen, Tautia esiintyy ei vain parenteraalisesti, vaan myös seksuaalista ja pystysuora (äidiltä sikiöön), t. E. Käytännöllisesti katsoen hepatiitti B -viruksen voi monin tavoin.

Hepatiitti B maailmassa tappoi yhtä monta ihmistä kuin toisen maailmansodan aikana. HBV: n kantajien määrä WHO: n mukaan on 0,1-20 prosenttia eri maista tai alueista.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Hepatiitti B: n diagnoosi

Tällä hetkellä hepatiitti B: n diagnoosimenetelmä on käänteisen passiivisen hemagglutinaatioreaktion (ROSGA) käyttö viruksen tai sen pinta-antigeenin, HBsAg, havaitsemiseksi. Kuten jo todettiin, pinta-antigeenin veri sisältää monta kertaa enemmän kuin itse virus (100-1000 kertaa). ROPGA: n reaktioon punasolujen herkistyminen hepatiitti B -viruksen vasta-aineille. Jos veressä on antigeeni, tapahtuu hemagglutinaatioreaktio. ROPGA on yksinkertainen, kätevä ja hyvin erikoinen. HBsAg-viruksen antigeenin vasta-aineiden havaitsemiseksi käytetään erilaisia immunologisia menetelmiä (DSC, RPGA, IFM, RIM jne.). Lisäksi PCR-variantteja käytetään HBV: n ja sen antigeenien havaitsemiseen.

Potilaan seerumissa (DSC, RPGA, saostusreaktio, IFM, RIM jne.) Voidaan käyttää erilaisia immunologisia menetelmiä viruksen antigeenin (HBsAg) vasta-aineiden havaitsemiseksi.

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Hepatiitti B: n erityinen ehkäisy

Ottaen huomioon hepatiitti B: n korkea esiintyminen ja myös, että maailmassa on paljon HBV-kantajaa, WHO: n rokotukset hepatiitti B: tä vastaan ovat pakollisia, ja ne on toteutettava ensimmäisen elinvuoden aikana. Rokotuksia suositellaan kahta lajia vastaan. Valmistettaessa yksi niistä viruksen kantajien plasmaa käytetään raaka-aineena, koska siinä oleva viruksen antigeeni sisältyy riittäviin määriin rokotteen valmistamiseksi. Tämän tyyppisen rokotteen valmistuksen tärkein edellytys on niiden täydellinen turvallisuus, eli täydellinen viruksen inaktivointi, joka saadaan rokotevalmisteteknologialla. Erilaisen tyypin mukaisen rokotteen valmistamiseksi käytetään geenitekniikan menetelmiä, erityisesti antigeeniä valmistettaessa käytettävää hepatiitti B -viruksen pinta-antigeenia tuottava hiivan rekombinanttiklooni.

Molemmat rokotteet ovat erittäin tehokkaita (suojaavat 95% rokotetuista). Kohdun jälkeisen immuniteetin kesto on vähintään 5-6 vuotta. Rokotteet on luotu sekä aikuisille että imeväisille ja pikkulapsille - tärkein osa hepatiitti B: n maailmanlaajuisessa torjunnassa. Rokotuksen täydellinen kesto koostuu kolmesta pistoksesta:

Annan - välittömästi syntymän jälkeen; II annos - 1-2 kuukauden kuluttua; III annosta - ensimmäisen elinvuoden loppuun asti.

Nämä rokotteet sisältyy laajempi ohjelma immunisaation, WHO: n ja linjassa kalenteriin sen toteuttamista (mukaan WHO: n suositusten 1. Elinvuoden suoritetaan rokottaminen tuberkuloosia, poliota, hepatiitti B, tuhkarokko, jäykkäkouristus, kurkkumätä, hinkuyskä).

Gammaglobuliinia, joka sisältää vasta-aineita HBV: tä vastaan, käytetään passiivisen immuuniprofylaksaan hätätilanteessa henkilöille, jotka ovat saaneet yhteyttä hepatiitti B -potilaan kanssa.

Hepatiitti B: n (akuutit ja krooniset muodot) hoitoon käytetään interferonia ja amiiniinia (sen endogeenisen synteesin indusoimiseksi). Kroonisen hepatiitti B: n hoidossa uusi lääke lamivudiini (synteettinen nukleosidi) on tehokas.