Hemoblastoosien immunofenotyyppi

Merkittävää edistystä hematologisissa tutkimuksissa liittynyt viime vuosina käyttää nykyaikaisia immunologisia menetelmiä ja automaattisia työkaluja analysointiin ja lajitteluun solujen ääreisverenkierron ja luuytimessä - virtaussytometreja. Perinteiset morfologiset ja sytokemiallisten tutkimus alustan solun sairaus (veri, punainen luuydin, imusolmukkeet, perna, jne), monissa tapauksissa, erityisesti lymfoproliferatiivisten sairauksien, eivät paljasta koko erilaisia vaihtoehtoja keskuudessa morfologisesti samanlaisia muotoja ja tunnistaa alkuperä patologinen kloonin . Nämä ongelmat voidaan ratkaista vain tutkimalla solujen immunologisia ominaisuuksia. Jokainen vaihe erilaistumisen hematopoieettisten solujen on oma joukko antigeenejä, jotka ovat kansainvälisen luokituksen tunnetaan erilaistumista ja erilaistuminen on jaettu klustereihin, nimetty CD.

Lohkossa erilaistumista neoplastisten muutosten voi tapahtua missä tahansa vaiheessa solun normaalin kehityksen tuloksena on patologisiin solujen klooni määritellään alustan tauti ja joilla on sama immunologinen (tai fenotyyppisten) ominaisuus. Sen jälkeen, kun tutkimus näiden markkerien solut voidaan määrittää millä tahansa muodossa tai suoritusmuodon taudin ovat johdonmukaisia, toisin sanoen perusteella immunologisen solun fenotyypin ero diagnoosi, joka on vaikein lymfoproliferatiiviset sairaudet, koska tärkein solusubstraattia patologiset sairaudet ovat lähes samantyyppistä solujen morfologisesti.

Fenotyypitystä avulla käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita tyypillistä blastisen solut ja kypsät myeloidinen veren mono-, lymfosyyttinen sarja läsnä Eriiaistumisantigeenien (reseptorit) soluseinään. Osassa "Organismin immuunitilan arviointi" selostetaan osittain solumerkkien ominaispiirteet ja diagnostinen merkitys; Alla on lyhyt kuvaus antigeenisistä solumarkkereista, joita käytetään hemoblastoosin diagnoosiin. Verisolujen ja punaisen luuytimen kalvoihin voidaan tunnistaa seuraavat antigeenit (markkerit).

• CD2 on monomeerinen transmembraaniglykoproteiini. Se esiintyy kaikkien kiertävien T-lymfosyyttien ja joidenkin NK-lymfosyyttien pinnalla. CD2 osallistuu T-lymfosyyttien vaihtoehtoiseen aktivointiin. CD2: n havaitsemista käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita kliinisessä käytännössä käytetään akuuttien T-soluleukemiasien, lymfoomien, kroonisten tulehduksellisten ja immunodefektien oireiden fenotyyppeihin.
• CD3 - proteiinikompleksi, joka liittyy antigeenispesifiseen T-solureseptoriin, on T-lymfosyyttien pääasiallinen funktionaalinen merkkiaine. Se mahdollistaa aktivointisignaalin siirtämisen kalvosta solun sytoplasmaan. CD3-detektio on osoitettu akuutin T-soluleukemian, lymfooman (CD3: n ei-ekspressoimista ei-T-solulymbooireilla) ja immuunikatovirheiden diagnosoinnissa.
• CD4 on transmembraaninen glykoproteiini, joka ilmenee sub-populaatiossa T-apuaineista (indusoijat), jotka muodostavat 45% perifeerisistä veren lymfosyyteistä. Lymfosyyttien kehityksen alkuvaiheissa CD1-antigeenit sekä CD8 ilmentävät kaikki kortikaaliset lymfosyytit. Medulaariset tymosyytit, joiden fenotyyppi on samanlainen kuin kypsät CD4 + T-solut perifeerisen veren (T-helpers), jo ilmaista joko CD4- tai CD8-reseptoreita. Perifeerisessä veressä jopa 5% soluista on samanaikaisesti leimattu CD4 ja CD8. CD4: n heikko ilmentyminen on mahdollista joillakin monosyyttisoluilla. CD4-ilmentyy useimmissa tapauksissa, T-solu lymfooma, mukaan lukien T-solulymfooman, ja HTLV-liittyy T-solujen leukemian (HTLV - ihmisen T-lymfotrooppinen virus - Ihmisen T-lymfotrooppinen virus).
• CD5 - B-lymfosyytit heikosti ekspressoivat yksiketjuista glykoproteiinia, joka esiintyy kaikilla kypsillä T-lymfosyytteillä ja useimmilla tymosyytteillä. CD5 havaitaan B-solun kroonisen lymfosyyttisen leukemian ja keskisyntyneen lymfooman neoplastisilla soluilla. Muissa pahanlaatuisissa imusolmukatoissa - follikulaarinen lymfooma, karvainen solu-leukemia, suuri solulymfooma - CD5: ta ei ilmaista.
• CD7 on yksisäikeinen proteiini, joka on aikaisin T-solujen erilaistumisen merkki. Pro-T-lymfosyytit ilmentävät sitä jo ennen kuin ne siirtyvät kateenkorvaukseen. CD7 havaitaan useimmissa NK-soluissa, heikko ilmentyminen havaitaan monosyyteissä. B-lymfosyytit ja granulosyytit eivät sisällä tätä antigeeniä. CD7: n määritelmää käytetään lymfoomien, lasten T-solulymfoblastisen leukemian diagnosointiin.
• CD8 on proteiini, joka koostuu kahdesta polypeptidiketjusta, jotka on liitetty disulfidisiltojen välityksellä. Sitä ilmaistaan sytotoksisten ja suppressoristen T-lymfosyyttien subpopulaatiolla, joka käsittää 20 - 35% perifeerisiä veren lymfosyyttejä. Tällä antigeenillä on myös NK-lymfosyyttejä, kortikaalisia tymosyyttejä, 30% medullary tymosyyttejä ja punaisten luuydinsolujen subpopulaatio. CD8: ta tutkitaan T-suppressorisisällön kvantitatiiviselle arvioinnille (katso kohtaa "T-lymfosyyttien vaimentimet veressä" yllä).

• CD10 on endopeptidaasi, joka liittyy solukalvoon. CD10 ilmentää nuoria B-lymfosyyttien muotoja ja aivokuoren lymfosyyttien subpopulaatiota. CD10 ilmaisevat kaikkien ALL-solujen.
• CD11c ekspressiota makrofaaseja, monosyyttejä, granulosyyttejä, NK-soluja ja karvaisten solujen leukemia-soluja solukalvoon.
• CD13 on myelomonosyyttisillä soluilla ekspressoitunut glykoproteiini (esisolut, neutrofiilit, basofiilit, eosinofiilit, monosyytit ja myeloidiset leukemia-solut). Ei ole T- ja B-lymfosyyttejä, erytrosyyttejä ja verihiutaleita.
• CD14 on pintalevyn glykoproteiini. Se ilmaistaan pääasiassa monosyyttien ja makrofagien kautta. CD14 havaitaan yli 95%: ssa perifeerisen veren ja luuytimen monosyyteistä. CD14: n voimakasta ilmentymistä havaitaan akuutissa myeloblastisessa leukemiassa. Akuuttia ja kroonista lymfoblastista leukemiaa tämä antigeeni ei ole ilmaistu.
• CD15 on oligosakkaridi. Hän osallistuu fagosytoosin ja kemotaksin prosesseihin. Tämä antigeeni on läsnä kypsän granulosyyttien ja Berezovsky-Sternberg-solujen pinnalla. CD15-antigeenin ilmentyminen havaitaan Hodgkinin taudissa. Muissa kuin Hodgkinin lymfoomissa CD15: ää ei havaita useimmissa tapauksissa.
• CD16 ilmentyy granulosyyttien, monosyyttien, makrofagien ja NK-solujen pinnalla. Kaikilla tämän antigeenin ilmentävillä lymfosyytteillä on kyky vasta-aineesta riippuvaiseen solun sytotoksisuuteen. CD16 määritetään kirjoitettaessa kroonisia myelosyyttisiä leukemiaa NK-solujen karakterisoimiseksi.
• CD19 on glykoproteiini, joka on läsnä kaikilla perifeeristen B-lymfosyyttien kohdalla samoin kuin kaikilla B-soluprekursoreilla. Se puuttuu plasmasoluista. Tämä on B-solujen varhaisin merkki, sillä on tärkeä rooli B-lymfosyyttien aktivaation ja proliferaation säätelyssä. CD19 ekspressoituu kaikilla B-solu-alkion akuutin leukemian neoplastisilla soluilla ja esiintyy myös joissakin akuutin monoblasti-leukemian muodoissa.
• CD20 on ei-glykosyloitu proteiini. B-lymfosyyttien ontogeneesissä CD20-antigeeni esiintyy CD19: n jälkeen lymfosyyttien pre-B-solujen erilaistumisen vaiheessa. Se puuttuu plasma-solujen plasmamembraanista. Se ilmaistaan ALL: ssä, B-solun kroonisessa lymfosyyttisessä leukemiassa, karvaisen solun leukemiassa, Burkittin lymfoomassa ja erittäin harvoin akuutissa monoblasti-leukemiassa.
• CD21 on glykoproteiini, joka on merkittävä määrä B-lymfosyyteissä imusolmukkeissa ja pienessä määrin perifeerisen veren B-soluissa. CD21 on Epstein-Barr-viruksen reseptori.
• CD22 on proteiini, joka koostuu kahdesta polypeptidiketjusta. Se ekspressoituu useimpien B-lymfosyyttien membraanissa, mukaan lukien progenitorisolut (prolymfosyytit). Antigeeniä ei ilmaista B-lymfosyyteillä (plasmasolut) niiden aktivaation jälkeen. CD22: n voimakkain ilmentyminen havaitaan soluissa, joissa on karvainen solu leukemia, heikko - myeloidisissa leukemiasissä ja ei-T-solussa ALL.
• CD23 on glykoproteiini, jota ilmentävät ääreisveren aktivoituneet B-lymfosyytit paljon suuremmassa määrin. CD23 välittää IgE-riippuvaisen sytotoksisuuden ja fagosytoosin makrofageilla ja eosinofiileillä.
• CD25 on yksiketjuinen glykoproteiini, joka tunnistetaan IL-2: n pienen affiniteetin reseptoriksi. Tämä reseptori ekspressoituu aktivoiduissa T-lymfosyyteissä ja alemman tiheyden ollessa aktivoiduissa B-soluissa. Terveiden ihmisten perifeerisessä veressä antigeeni on läsnä yli 5% lymfoidisissa soluissa.
• CD29 on fibronektiinireseptori. Se jakautuu laajalti kudoksiin, se ilmaistaan leukosyyteillä. Ääreisverisolujen CD29-detektointia käytetään typistämään T-solujen subpopulaatiota, jolla on CD4 + CD29 + -fenotyyppi, joita kutsutaan tyypin 2 auttajaksi (Th2). Nämä solut osallistuvat lymfokiinien tuotannon kautta humoraalisen immuunivasteen aikaansaamiseen.
• CD33 on transmembraaninen glykoproteiini. Se on läsnä myeloidisen ja monosyyttisarjan solujen pinnalla. Se löytyy monosyyttien pinnasta ja vähäisemmässä määrin ääreisveren granulosyytteistä. Noin 30% punaisista luuydinsoluista ilmentää CD33: tä, mukaan lukien myeloblastit, promyelosyytit ja myelosyytit. Antigeeni puuttuu pluripotenttien kantasolujen membraaneista. CD33: ta käytetään karakterisoimaan soluja myeloidisissa leukemiasoluissa. Lymfo- ja erytroidisten solujen leukemia-solut eivät ilmaise CD33: ta.
• CD34 on fosfoglykoproteiini, jota ilmaisevat hematopoieettiset progenitorisolut, mukaan lukien monopotentit kantasolut. Ar: n voimakkain ilmentyminen havaitaan varhaisissa progenitorissa; kun solut kypsyvät, merkin ekspressiota putoaa. CD34 löytyy myös endoteelisoluista. CD34: ta käytetään solujen karakterisointiin akuutissa myelogeenisessa ja lymfoblastisessa leukemiassa. Kroonisen lymfosyyttisen leukemian ja lymfoomien yhteydessä CD34-antigeenin ilmentymistä ei havaita.

• CD41a: ta ilmentää verihiutaleet ja megakaryosyytit. Monoklonaalisia vasta-aineita CD41a-detektiota varten käytetään megakaryooblastisen leukemian diagnosointiin. Glązmann-trombastenia ilmaantuu tämän antigeenin puuttuminen tai merkittävästi tukahdutetaan.
• CD42b on kalvon glykoproteiini, joka koostuu kahdesta polypeptidiketjusta. Merkki löytyy verihiutaleiden ja megakaryosyyttien pinnalta. Kliinisessä käytännössä CD42b: n havaitsemista käytetään trombosytopatian - Bernard-Soulier-oireyhtymän diagnosointiin.
• CD45RA kuuluu transmembraanisten glykoproteiinien luokkaan. Tämä on yleinen leukosyyttiantigeeni. Se ilmaistaan B-lymfosyyttien solumembraanissa, vähäisemmässä määrin T-lymfosyytteihin ja kypsissä keskipitkällä tymosyyteillä. Granulosyyttejä ei ilmaise merkkiaineita.
• CD45RO on CD45RA: n pienimolekyylipainoinen isoformi - yleinen leukosyytti Ag. Ne löytyvät T-soluista (muistin T-lymfosyytit), B-lymfosyyttien, monosyyttien ja makrofagien subpopulaatiot. CD45RO: n monoklonaaliset vasta-aineet ovat vuorovaikutuksessa useimpien tymosyyttien kanssa, lepäävien CD4 + ja CD8 + T-lymfosyyttien ja kypsät aktivoitujen T-solujen subpopulaatio. Myelomonosyyttistä alkuperää olevat solut, granulosyytit ja monosyytit myös kantavat tätä antigeenia. Se havaitaan centroblastisissa ja immunoblastisissa lymfoomissa.
• CD46-O-glykosyloitu dimeeri. Se on laajalti kudoksiin ja ilmaisi T- ja B-lymfosyytit, monosyytit, granulosyytit, NK-solut, verihiutaleet, endoteelisolut, fibroblastit, mutta on poissa punasolujen pintaan. CD46 tarjoaa kudoksen suojauksen täydennykseltä.
• CD61 on verihiutaleantigeeni. Se ilmaistaan perifeerisen veren ja punaisen luuytimen verihiutaleilla samoin kuin megakaryosyytteihin ja megakaryoblasteihin. Sen määritelmää käytetään akuutin megakaryoblastisen leukemian merkkiaineena. Antigeenin ilmentäminen puuttuu tai tukahdutetaan potilailla, joilla on Glanzmannin trombastenia.
• CD95, jota kutsutaan myös nimellä Fas tai APO-1, on transmembraaninen glykoproteiini, joka on kasvainekroositekijän reseptorien perheen jäsen. Se ilmaistaan merkittävässä määrin ääreisveren T-lymfosyytteihin (CD4 + ja CD8 +) ja vähäisemmässä määrin B-lymfosyytteihin ja NK-soluihin. Tämä antigeeni ekspressoituu myös granulosyyttejä, monosyyttejä, kudossoluja ja neoplastisia soluja. CD95: n sitoutuminen Fas-ligandiin (CD95L) indusoi apoptoosia soluissa.
• CD95L: n tai Fas-ligandin, membraaniproteiinin, joka kuuluu tuumorinekroositekijän reseptoreihin. Tämä antigeeni ekspressoituu sytotoksisilla T-lymfosyytteillä, NK-soluilla ja hyvin usein tuumorisoluilla; apoptoosin pääasiallinen induktori soluissa.
• HLA-DR on monomorfinen determinantti tärkeimmän ihmisen histokompatibility -kompleksin (HLA) II-luokan molekyyleistä. Merkki ekspressoituu Langerhansin soluissa, imusolmukkeiden dendriittisoluissa, tiettyjen makrofagien, B-lymfosyyttien, aktivoidun T-solujen ja kateenkorvan epiteelisolujen tyypissä. Tämän markkerin testiä käytetään aktivoidun T-lymfosyyttien kvantifioimiseksi fenotyypillä CD3 + HLA-DR +.

Käyttämällä erilaisia valittuja monoklonaalisia vasta-aineita markkereihin on mahdollista tehdä fenotyyppinen muotokuva soluista, jotka ovat ominaisia tietyn leukemian muodon suhteen.

Lisäksi käyttäen immunofenotyypitystä tekniikoita diagnoosin ja ero diagnoosi hematologisten maligniteettien, erityisen tärkeää kääntää niiden käyttöä hoidettaessa prosessin tilan arvioimiseksi peruuttamista ja jäljellä populaatio leukemiasolujen. Tietäen fenotyyppinen "muotokuva" Blastisolujen vuosina diagnoosi, näiden merkintöjen se löytää solun leukemisten klooni remissiossa ja kasvusta niiden määrä - ennustaa kehitystä uusiutumisen pitkä (1-4 kk), kunnes sen kliinisten ja morfologiset piirteet.

[1], [2], [3], [4],