Veriproteiinien immunoelektroforeesi

Verisolumäärissä ei ole paraproteiineja.

Immunoglobulinopatiat tai gammopatiat yhdistävät suuren patologisen tilan ryhmän, jolle on ominaista polyklonaalinen tai monoklonaalinen hypergammaglobulinemia. Immunoglobuliinit koostuvat kahdesta raskaasta (H) -ketjusta (molekyylipaino 50 000) ja kahdesta kevyestä (L) -ketjusta (molekyylipaino 25 000). Ketjut liitetään disulfidisillan kautta ja muodostuvat rakenteista, joita kutsutaan domeeneiksi (H - 4, L - 2 domeenista). Proteolyyttisten entsyymien vaikutuksen alaisena Ig leviää fragmentteihin: Fc-fragmentti ja Fab-fragmentti. Ihmisen lg: n raskaita ketjuja edustavat viisi rakenteellista varianttia, joita merkitään kreikkalaisen aakkoston kirjaimilla: γ, α, μ, δ, ε. Ne vastaavat 5 luokkaa Ig - G, A, M, D, E. Kevyitä ketjuja edustavat kaksi rakenteellisesti erilaista versiota: κ (kappa) ja λ (lambda), jotka vastaavat kahta lg - tyyppiä jokaiselle luokalle. Jokaisessa Ig-molekyylissä sekä raskaat että kevytketjut ovat identtisiä. Kaikilla ihmisillä on normaalisti kaikki luokan ja molemmat tyypit Ig, mutta niiden suhteellinen sisältö ei ole sama. Molempien Ig: n ja λ: n välinen suhde eri Ig-luokkien välillä ei myöskään ole sama. Ig: n tai niiden fragmenttien rikkomisen havaitseminen on ratkaisevassa asemassa monoklonaalisten immunoglobulinopatioiden diagnoosissa.

Monoklonaalinen immunoglobulinopatiya (paraproteinemia) - oireyhtymä, joka on ilmaistu kertymistä seerumin ja / tai virtsan kaikista potilaista homogeenisen fysikaalis-kemialliset ja biologiset parametrit Ig-, tai niiden fragmentteja. Oleva monoklonaalinen Ig, (paraproteins, M-proteiinit) - erittyminen yksittäinen klooni B-lymfosyyttien (plasma-solut), ja ovat siksi rakenteellisesti homogeeninen allas molekyylejä, joilla on raskaan ketjun luokan (alaluokka) samaa tyyppiä kevyen ketjun ja vaihteleva alue on sama rakenne. Monoklonaaliset immunoglobulinopatiat jakautuvat yleensä hyvänlaatuisiin ja pahanlaatuisiin. Hyvänlaatuisissa monoklonaalisissa gammapatiatyypeissä plasman solujen proliferaatiota kontrolloidaan (mahdollisesti immuunijärjestelmällä) siten, että kliiniset oireet puuttuvat. Pahanlaatuisissa muodoissa esiintyy imusolmukkeiden tai plasman solujen hallitsematonta proliferaatiota, joka määrittelee taudin kliinisen kuvan.

Monoklonaalisen immunoglobulinopatian luokitus

Gonorrean luokka	Patologian luonne	Patologisen Ig: n konsentraatio seerumissa, g / l
B-solu pahanlaatuinen	Multipleella myeloma, Waldenström makroglobulinemia	Yli 25
	Plasmytoma (solitary-bone ja extramedullary), lymfooma, krooninen lymfosyyttinen leukemia, raskasketjutauti	Merkittävästi alle 25
B-solujen hyvänlaatuinen	Tuntemattomasta alkuperästä peräisin olevat monoklonaaliset gammopatiat	Alla on 25
Immuunikatavuiset tilat, joissa immuunijärjestelmän T- ja B-yksiköt ovat epätasapainossa	Ensisijainen (Wiskott-Aldrichin oireyhtymät, Di-Georgi, Nezalef, vaikea yhdistetty immuunikatosi)	Alla on 25
	Toissijainen (ikään liittyvä immunosupressanttisten aineiden käyttö, joka liittyy ei-imusolmukavaan onkologisiin sairauksiin (esim. Paksusuolen syöpä, rintasyöpä, eturauhanen jne.)	Alle 2.5
Immuunikatavuiset tilat, joissa immuunijärjestelmän T- ja B-yksiköt ovat epätasapainossa	Immuunijärjestelmän uudelleenrakentaminen punaisen luuydinsiirron jälkeen	Alla on 25
	Antigeeninen stimulaatio varhaisessa ontogeneesissä (kohdunsisäinen infektio)	Alla on 25
Homogeeninen immuunivaste	Bakteeri-infektiot	Alla on 25
	Autoimmuunisairaudet, kuten kryoglobulinemia, SLE, nivelreuma jne.	Alla on 25

Verisolujen proteiinien immunoelektroforeesi mahdollistaa monoklonaalisten (patologisten) IgA: n, IgM: n, IgG: n, ketjun H ja L, paraproteiinien detektoimisen. Tavallisella elektroforeesilla on normaali Ig, heterogeeninen ominaisuuksissa, jotka sijaitsevat γ-vyöhykkeellä muodostaen tasan tai laajakaistan. Monoklonaalinen Ig siirtyy pääosin γ-vyöhykkeelle, satunnaisesti vyöhykkeelle β ja jopa a-alueelle, missä ne muodostavat korkean piikin tai selvästi rajautuneen kaistan (M-gradientti).

Multipleella myeloma (Rustitzky-Kahlerin tauti) on yleisin paraproteineminen hemoblastoosi; se tunnistetaan harvemmin kuin krooninen myelo- ja lymfosyyttinen leukemia, lymphogranulomatosis ja akuutti leukemia. Myelooman erittämä patologisen Ig: n luokka ja tyyppi määrää taudin immunokemiallisen variantin. Luokan ja tyypin patologisen Ig: n taajuus myeloomassa kokonaisuutena korreloi terveiden ihmisten normaalien Ig-luokka- ja tyyppien suhteiden kanssa.

Patologisen Ig: n pitoisuuden lisääntymisen myelooman potilaiden seerumissa määritetään normaali Ig pienentyneessä pitoisuudessa. Kokonaisproteiinin pitoisuus kasvaa jyrkästi - jopa 100 g / l. Prosessin aktiivisuus G-myelooman kanssa on arvioitu plasmosyyttien lukumääräl- lä sikiöllä, kreatiniinin ja kalsiumin pitoisuudesta seerumissa (kalsiumin lisääntyminen osoittaa taudin etenemistä). M-proteiinin pitoisuus (virtsassa, jota kutsutaan Bens-Jones-proteiiniksi) toimii kriteerinä A-myelooman taudin etenemisen arvioimisessa. Parafiinien pitoisuus seerumissa ja virtsassa vaihtelee sairauden aikana hoidon vaikutuksen alaisena.

Usean myelooman diagnosointiin tarvitaan seuraavat kriteerit.

Suuri kriteeri

1. Plasmacytoma biopsian tulosten perusteella.
2. Plasmosytoosi punaisessa luuytimessä (yli 30% soluista).
3. Heraproteiinin elektroforeesiin kohdistuvat monoklonaaliset (patologiset) Ig-arvot: yli IgG: n huippupitoisuus yli 35 g / l tai yli IgG: n huippupitoisuus yli 20 g / l. Κ- ja λ-ketjujen erittyminen 1 g / vrk tai enemmän, mikä ilmenee virtsan elektroforeesilla potilaassa, jolla ei ole amyloidoosia.

Pienet kriteerit

1. Plasmosytoosi on 10-30% solujen punaisessa luuytimessä.
2. Peak PIg seerumissa pienemmällä määrällä kuin edellä on osoitettu.
3. Lonkatulehdukset luista.
4. Normaalin IgM: n konsentraatio on alle 0,5 g / l, IgA on alle 1 g / l tai IgG on alle 0,6 g / l.

Multipleelooma diagnoosi edellyttää vähintään 1 isoa ja 1 pientä kriteeriä tai 3 pientä kriteeriä 1 ja 2 kohdassa annettujen pakollisten kriteerien kanssa.

Myelooman vaiheen määrittämiseksi käytetään Dury-Salmonin standardisointisysteemiä, joka heijastaa kasvaimen vaurion tilavuutta.

Kaikki ryhmät myeloomat jakaa alaluokkiin riippuen tilasta munuaisten toiminta: A - pitoisuus seerumin kreatiniini alle 2 mg% (176,8 umol / l), B - 2 mg%. Korkeilla myelooma β ₂ -mikroglobuliinin seerumin (yli 6000 ng / ml), viittaa siihen, huono ennuste, sekä korkea LDH-aktiivisuus (yli 300 IU / I, mikä aiheuttaa reaktiota 30 ° C: ssa), anemia, munuaisten vajaatoiminta, hyperkalcemia, hypoalbuminemia ja suuri tuumorin tilavuus.

Keuhkojen taudit (Bence-Jones myelooma) muodostavat noin 20% myeloomaa. Bence-Jones-myelooman kanssa muodostuu yksinomaan vapaita kevyitä ketjuja, jotka havaitaan virtsassa (Bence-Jones-proteiini), ilman seerumin patologista Ig: tä (M-gradienttia).

Usean myelooman vaiheet

vaihe	kriteerit	Kasvaimen paino (solujen määrä), x10 12 / m 2
minä	Pieni myelooma, jolla on seuraavat kriteerit: Hemoglobiinin pitoisuus veressä on yli 100 g / l; Kalsiumin kokonaispitoisuus veriseerumissa on normaalia (<3 mmol / l); Mitään luun muutoksia luun röntgen tai solitary plasmacytomaa aikana; Alhainen parafiinien pitoisuus veriseerumissa (IgG alle 50 g / l, IgA alle 30 g / l); L-ketjut (Bens-Jones-proteiini) virtsassa alle 4 g / 24 h	<0,6
II	Väliaikainen myelooma (kriteerit ovat vaiheiden I ja III välillä)	0,6-1,2
III	Suuri myelooma, jolla on yksi tai useampi seuraavista kriteereistä: Hemoglobiinin pitoisuus veressä on alle 85 g / l; Kalsiumin kokonaispitoisuus seerumissa yli 12 mg% (3 mmol / l); Laaja vartalon vaurio tai suuret murtumat; Veren seerumin seeproteiinien (IgG yli 70 g / l, IgA: n yli 50 g / l) korkea pitoisuus; L-ketjut (Bens-Jones-proteiini) virtsassa yli 12 g / 24 h.	> 1,2

Harvinainen immunokemiallinen suoritusmuodot ovat ei-sekretorisen myelooma myelooma paraproteins, jolla voidaan havaita vain sytoplasmassa myeloomasolujen ja diklonovye myelooma ja myelooman-M.

Waldenströmin makroglobulinemia - subleukemic krooninen leukemia, B-solujen alkuperä, morfologisesti edustaa lymfosyyttien, plasmasolujen ja kaikki välimuotoja solujen syntetisoimiseksi RIgM (makroglobuliini). Kasvaimella on alhainen pahanlaatuisuusaste. Luuytimessä lisääntymistä havaita pieniä basofiilisiä lymfosyyttejä (plasmasolumaisten lymfosyytit) lisäsi syöttösolujen lukumäärä. Vuonna electrophoregram seerumin proteiinit paljastavat M-gradientti vyöhyke β- tai γ-globuliinit, ainakin paraprotein ei kulkeutuisi sähkökentässä, kun taas jäljellä paikallaan. Immunokemiallisesti hän edustaa PIgM: tä yhden tyypin kevyen ketjun kanssa. PIgM: n konsentraatio veriseerumissa Waldenstromin makroglobulinemian kanssa vaihtelee välillä 30 - 79 g / l. 55-80%: lla potilaista Bens-Jones-proteiinia havaitaan virtsaan. Normaalin Ig: n pitoisuus veressä pienenee. Munuaisten vajaatoiminta kehittyy harvoin.

Lymfoomat. Useimmin tallennettu IgM-erittävien lymfooma, toinen paikka on käytössä paraproteinemic lymfooma erittävien IgG, IgA-lymfooma paraproteinemia havaittu erittäin harvinaisia. Useimmilla potilailla todetaan normaalin Ig: n (tavallisesti pienen määrin) lymfoomien pitoisuuden väheneminen.

Raskasketjujen tautit - B-solujen imusuonien kasvaimet, joihin liittyy raskasketjujen Ig: n monoklonaalisten fragmenttien tuotanto. Raskaiden ketjujen taudit ovat hyvin harvinaisia. Raskaaseen ketjuun liittyvää tautia on 4 tyyppiä: α, γ, μ, δ. Raskaat ketjut γ tautia esiintyy yleensä miehillä 40 vuotta nuorempaa, se on tyypillistä laajentuminen maksaan, pernaan, imusolmukkeisiin, turvotus pehmeä suulaki ja kieli, punoitus, kuume. Luiden tuhoaminen ei periaatteessa kehity. Patologisen globuliinin pitoisuus veriseerumissa on alhainen, ESR on normaali. Luuytimessä on lymfoidisia soluja ja eriasteisia kypsyysasteita olevia plasmaseja. Tauti etenee nopeasti ja päättyy kuolemaan muutaman kuukauden sisällä. Raskaiden ketjujen tautia havaitaan pääasiassa iäkkäillä ihmisillä, sitä esiintyy useammin hepatosplenomegalian myötä. Substraatti-kasvain - lymfoidiset elementit, joiden kypsyysaste vaihtelee. Yksittäisiä raskaiden ketjun tautien δ tapauksia kuvataan, se etenee myelooma. Vaikea ketjutauti α on yleisimpiä muotoja, jotka kehittyvät pääasiassa lapsilla ja alle 30-vuotiailla, 85 prosenttia tapauksista ilmoitetaan Välimerellä. Veren seerumin ja virtsan immunoelektroforeesi on ainoa tapa taudin diagnosoimiseksi, koska seerumin proteiinien elektroforeesiin klassinen M-gradientti ei useinkaan ole.

Reaktiivinen paraproteinemia tapahtua, kun läsnä on geneettinen taipumus vastauksena bakteeri- ja virusinfektiot (hepatiitti, CMV-infektio) tai loistartunta (leishmaniaasi, toksoplasmoosi, skistosomiaasin). Tämä monoklonaalisen immunoglobulinopatian muoto kirjattiin elimensiirron aikana, sytostaattisten lääkkeiden, perinnöllisten tai hankittujen immunodeficientien hoidossa. Väliaikaisille paraproteinemioille on tunnusomaista alhainen seerumin PIg-pitoisuus, virtsan Bence-Jones-proteiinin puuttuminen tai jäljitysmäärät.

Liittynyt paraproteinemia liittyy useisiin sairauksiin, joiden patogeneesiin immuunimekanismit ovat tärkeässä asemassa: autoimmuunisairaudet, kasvaimet, krooniset infektiot. Näihin sairauksiin kuuluvat AL-amyloidoosi ja kryoglobulinemia.

Idiopaattinen paraproteinemia esiintyy iäkkäillä ihmisillä, ja se voi olla primaemoniarvoja. Tällaisissa tapauksissa perusteellinen tutkimus on tarpeen taudin alkuvaiheen ja pitkäaikaisen dynaamisen havainnoinnin tunnistamiseksi.

Oireita ovat hyvänlaatuisia paraproteinemia: ei Bence-Jones-proteiinin, pitoisuuden muutosten normaalin Ig määrä plasman soluja luuytimessä pistemäinen vähemmän kuin 15%, vähemmän kuin 20% lymfosyyttejä, seerumin paraprotein pitoisuus on alle 30 g / l.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],