Dermaalinen ekvivalenssi. Alkuhistoria ja kliinisten tutkimusten tulokset

1980-luvun lopulla Stanfordin yliopistossa kehitettiin nestemäinen naudan kollageenin muoto, joka muuttui pehmeäksi ja elastiseksi substraatiksi kehon lämmössä. Lääke rekisteröitiin ja hyväksyttiin käytettäväksi useissa Euroopan maissa implantoitavana aineena nimeltä Zyderm Collagen Implantant. Tästä lääkkeestä tuli ensimmäinen implantti. Myöhemmin ilmestyi muita muotomuovien korjausmenetelmiä, kuten Restylane, Perlane, Pharmacrylic gel, Artecol, Biopolymer gel ja muita. Näitä lääkkeitä alettiin käyttää paitsi ääriviivojen mallintamiseen ja ikään liittyvien ihomuutosten korjaamiseen, myös hoitoon tai tarkemmin sanottuna arpien lievitykseen. Kaikki ne ruiskutettiin arven pohjan alle.

Kehittyneempien hypotrofisten arpien hoitomenetelmien etsintä johti meidät ajatukseen käyttää tähän tarkoitukseen keinotekoisesti luotua ihon analogia - "dermaaliekvivalenttia" (DE), jossa myös käytetään nestemäistä kollageenia. Keinotekoisille ihonkorvikkeille oli monia vaihtoehtoja, mutta yleisenä ajatuksena oli luoda ihon kaltainen kudos dermiksen rakenneosista, jota ei hylkisi elinsiirtojen yhteydessä ja joka olisi hyvä substraatti dermiksen ja epidermiksen omien osien sisäänkasvulle. On tunnettua, että dermiksen pääasialliset rakenneosat ovat solu-, kuitu- ja kudoselementit. Kuituelementtejä edustavat pääasiassa kollageeni- ja elastiinikuidut, ja kudoselementtiä - glykoproteiinit, proteoglykaanit ja glykosaminoglykaanit. Dermiksen tärkein toiminnallinen soluelementti on fibroblasti, ja fibroblastien solupopulaatio on lähes kaikkien dermiksen rakenneosien muodostumisen lähde. Siksi "ihonkorviketta" luodessaan useimmat tiedemiehet käyttävät kollageenisubstraattia, johon on sekoitettu fibroblasteja ja glykosaminoglykaaneja. Päälle levitetään jossain muodossa keratinosyyttikerros, joka luo täydellisen ihokerroksen ja nopeuttaa siirretyn ihovastineen elinkelpoisuuden palautumista. Tätä edistävät lukuisat keratinosyyttien erittämät kasvutekijät. Yksi ensimmäisistä "elävän ihovastineen" versioista esitettiin vuonna 1983 E. Bellin ym. toimesta. Ihofibroblasteja sekoitettiin kollageenin, plasman ja kasvualustan kanssa, mikä johti geelin muodostumiseen, jonka pinnalle keratinosyyttejä kasvatettiin. Kaikkea tätä viljeltiin 1-2 viikkoa in vilro, minkä jälkeen ihovastinetta pidettiin kypsänä ja se edusti elinkelpoista kudosta läpikuultavan elastisen massan muodossa. Kirjoittajat ehdottivat sen siirtämistä palovammapotilaiden haavapinnoille täydellisen ihorakenteen luomiseksi. Jotkut kirjoittajat käyttivät kollageenisientä tai kollageenimatriisia, joka oli peitetty proteoglykaaneilla ja täytetty fibroblasteilla, ihovastineen pohjana, jonka päälle kasvatettiin autologisia keratinosyyttejä. Tuloksena luotiin niin sanottu kolmiulotteinen malli ihosta. Keratinosyyttien viljelyyn haavapinnoille siirtämistä varten jotkut kirjoittajat käyttivät myös keinotekoista kollageenin, glykosaminoglykaanien ja kitosaanin matriisia, ruumiin ihoa ja sian ihoa substraattina. 7–14 päivän kuluttua viljelyn aloittamisesta potilaiden tai eläinten haavoihin siirrettiin kokonainen siirre, joka sisälsi dermiksen ja epidermiksen.

Keinotekoista ihon korviketta on käytetty paitsi palovammojen uhrien ihon palauttamiseen, myös lääkkeiden sytotoksisuuden testaamiseen ja kasvutekijöiden tutkimiseen in vitro.

Syvien hypotrofisten arpien kirurgisen dermabraasion ja MPC:n siirron yhdistelmän riittämätön tehokkuus mielestämme antoi syyn yrittää tasoittaa ihon lievitystä ruiskuttamalla hypotrofisen arven syvennykseen ihovastineen analogia. Ihovastineen luomisen substraattina käytettiin laboratoriossa saatua nestemäistä kollageenia, johon oli lisätty fibroblastisuspensiota. Ihovastine, samoin kuin MPC, luotiin erikoislaboratoriossa, joka oli sertifioitu tämän tyyppiseen toimintaan, ja leikkauspäivänä ja -aikana se toimitettiin lasipullossa jään kanssa klinikalle.

Arven leikkaus kiillotettiin standarditekniikalla ihon antiseptisen käsittelyn ja 2 % lidokaiinilla, novokaiinilla tai ultrakaiinilla tehdyn paikallispuudutuksen jälkeen. Kiillotus tasoitti arven pinnan ja samalla loi olosuhteet viljeltyjen solujen tai solukoostumusten kiinnittymiselle. Tämän jälkeen jäähdytetty nestemäinen kollageenigeeli, johon oli inokuloitu fibroblasteja, levitettiin steriilillä lastalla hypotrofisten arpien kiillotetulle pinnalle (arven syvennykseen), missä se polymeroitui ruumiinlämmön vaikutuksesta.

Tämän seurauksena 5–10 minuutin kuluttua fibroblastien kanssa kollageeni polymeroitui nestemäisestä tilasta paksuun geelimäiseen tilaan. DE:n sakeuduttua päälle laitettiin side, jossa oli suspensiota tai MPC:tä alustalla.

Monikerroksinen steriili sidos kiinnitettiin kuten MPC-siirrossa. Arven pinnasta, haavan peitteestä, jolla keratinosyytit sijaitsivat, ja jauhatuksen tyypistä riippuen sidos hylkiytyi 7–12 päivän kuluessa.

Hypotrofisten arpien yhdistelmähoitomenetelmä kirurgisella dermabrasiolla ja sen jälkeen "ihoekvivalentin" ja keratinosyyttien siirtäminen monikerroksisena kerroksena, joka on kasvatettu erityisille haavasidoksille tai suspensiona arven syvennykseen, mahdollistaa huomattavasti parempien, kosmeettisesti hyväksyttävien tulosten saavuttamisen (-)kudoksen vähenemisellä tai täydellisellä katoamisella. Ihoekvivalentti muodostaa potilaan oman kudoksen (dermiksen), ja arpikudos jää vasta muodostuneen kudoksen alle. MPC luo normaalin paksuisen ja toiminnallisen aktiivisuuden omaavan epidermiksen, minkä ansiosta arven yleisilme yleensä paranee merkittävästi useiden kuukausien aikana.

Tätä hypotrofisten arpien hoitotaktiikkaa voidaan kutsua optimaaliseksi tämän ongelman ratkaisemiseksi tänä päivänä. Käyttämämme DE-variantti, kollageenigeelin muodossa, johon on inokuloitu fibroblasteja, ei kuitenkaan ole kovin kätevä käyttää. Hypotrofisten arpien hoitoon tarkoitetun DE:n tulisi aluksi olla paksumpaa, jotta se voidaan asettaa arven onteloon, levittää siihen ja sitten levittää päälle keratinosyyteillä varustettu haavapeite. Voidaan siis sanoa, että tämä suunta hypotrofisten arpien hoidossa on vasta hahmoteltu, mutta ennusteet sen jatkokehitykselle ja tutkimukselle ovat erittäin optimistisia.

Monikerroksisten keratinosyyttikerrosten hankkimisen monimutkaisuus ja korkeat kustannukset terapeuttisena materiaalina herättivät tarpeen etsiä muita vaihtoehtoja solukoostumuksille. Tutkijoita kiinnostaa suuresti fibroblastien viljely, jotka haavapinnoille siirrettyinä antavat monin tavoin samanlaisen vaikutuksen kuin keratinosyyttisiirron tulokset, mutta ovat paljon yksinkertaisempi ja halvempi solumateriaali. Tutkimuksissamme hoidimme useita hypotrofisia arpia sairastavia potilaita mesoterapeuttisella fibroblastisuspension injektiolla arpien alle.

Arpien alle lisättiin mesoterapeuttisia tekniikoita (mikropapulaarinen, infiltratiivinen) käyttäen kasvualustassa olevaa fibroblastisuspensiota, jossa oli 1,5–2 miljoonaa solua per ml. Hoitokertojen määrä oli 4–10 riippuen arven iästä, potilaan iästä ja vian syvyydestä. Hoitokertojen välinen aika oli 7–10 päivää. Yleensä autologisten ja allogeenisten fibroblastien suspension lisäämiseen liittyi lievä, ohimenevä verisuonireaktio.

Kliinisten tutkimusten tuloksena havaittiin, että siirrettyjen MPC-solujen vaikutuksesta ihon ja arpien tulehdusreaktion kesto kirurgisen dermabrasion jälkeen lyhenee ja haavapintojen epitelisaatio kiihtyy keskimäärin 3-4 päivällä.

Työskenneltäessä normotrofisten ja hypertrofisten arpien kanssa on erittäin tärkeää nopeuttaa leikkauksen jälkeisten eroosioiden paranemista, koska juuri tässä on mahdollisuus saavuttaa optimaalinen terapeuttinen vaikutus.

Ihokudoksen siirto johti hypotrofisten arpien täyttymiseen (-) kudoksella, tasoittaen niiden reliefin ja siloittaen ne ympäröivän ihon kanssa, minkä seurauksena arpien pinta-ala pieneni merkittävästi.

Fibroblastisuspension lisääminen hypotrofisiin arpiin johti myös ihon kohokuvioinnin tasoitumiseen ja arpien pinta-alan pienenemiseen.

Kaikissa solusiirtotapauksissa havaittiin jälkivaikutus, jossa arpien esteettinen ulkonäkö parani useiden kuukausien aikana ja arvet muuttuivat yleensä ihomaiseksi rakenteeksi.

Kaikki havaitsemamme vaikutukset liittyvät siirrettyjen solujen biostimuloivan potentiaalin toteutumiseen. Näyttää siltä, että siirrettyjen solukerrosten lukumäärä on yleensä 10–30 % suurempi. Näin ollen kokonaissolujen potentiaali pinta-alayksikköä kohti on jo 10–30 % normaalia korkeampi. Lisäksi parhaat tulokset keratinosyyttien ja fibroblastien siirrossa saatiin siirrettäessä solumateriaalia nuorilta terveiltä ihmisiltä. Tämä seikka muuten puhuu nuorilta ja terveiltä luovuttajilta saadun allogeenisen viljelmän käytön puolesta. Tällaisen viljelmän bioenergeettistä ja informaatiopotentiaalia siirretään vastaanottajien omiin, joskus ei kovin nuoriin, soluihin, minkä ansiosta vastaanottajien omien kudosten ja solujen "laatu" paranee.

Siten keratinosyytti- ja fibroblastiviljelmän käyttö mahdollistaa:

• Nopeuta arpien epitelisaatiota dermabrasion jälkeen.
• Vähennä arpien näkyvyyttä paitsi tasoittamalla niiden pinta ympäröivän ihon pintaan, myös muodostamalla niiden päälle täysimittaisen epidermiksen.
• Paranna kirurgisen dermabraasion tuloksia siirrettyjen solujen sytokiinien vaikutuksesta arpeen, joka lopulta pyrkii muuttumaan ihon kaltaiseksi rakenteeksi.
• Saadakseen esteettisesti merkittävästi hyväksyttävämpiä hoitotuloksia potilailla, joilla on normotrofisia, hypotrofisia, hypertrofisia tai atrofisia arpia ja striaea.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]